柽柳eIF1A基因植物表达载体的构建及功能验证.pdfVIP

摘要 摘要 本研究是将从抗旱、耐盐植物柽柳(劢聊甜托妒)中克隆得到的eⅢ1A基因构建到植物 II上，采用根癌农杆菌介导法进行烟草的遗传转化，获得了89株卡那霉素 表达载体pI的K 表达量不同，是内标基因GAPDH的14．61倍～290．42倍。 ■ (1)对各转基因烟草To代分别进行了盐胁迫和干旱胁迫处理。分析了To代转基因烟 草的耐盐抗旱能力，结果显示：在NaCl浓度为24№儿时，各转基因烟草组培苗大部分 生长良好，生根率在50％以上，盐害指数均低于57．5％，而To代非转基因烟草对照不能生 根，盐害指数高达67．7％。结果表明，转eⅢ1A基因烟草的耐盐性得到明显提高。在不同浓 度NaCl胁迫下，转基因株系的增重均高于非转基因烟草对照，随着NaCl浓度的增加，非 转基因烟草对照的生长明显减弱，而转基因烟草重量增加明显高于对照。分析了不同浓度 NaCl对烟草细胞膜系统的影响，结果显示，各转基因植株的相对电导率、MDA含量均低于 非转基因烟草对照，说明各转基因烟草细胞膜受到盐胁迫的伤害较小。不同浓度NaCl胁迫 下SOD活性测定显示，各转基因烟草和非转基因对照的SOD活性是随着盐浓度的升高而 升高，但各转基因烟草SOD活性增幅明显高于非转基因烟草对照。 对转基因烟草To代盆栽苗分别进行干旱胁迫试验显示：在20d干旱胁迫条件下，非转基 胁迫10d、20d的相对电导率测定表明，各转基因烟草和非转基因对照烟草对电导率都有升 高的趋势，但各转基因烟草的增幅较小；对SOD活性和可溶性蛋白含量测定表明，各转基 因烟草和对照烟草均是随着旱胁迫时间的延长而升高。 NaCl胁迫下， (2)对各转基因烟草Tl代盆栽苗分别进行了盐胁迫处理，340111IIlol／L 对相对电导率、MDA含量分析表明，转基因烟草的细胞膜系统受损较对照轻。盐胁迫下各 转基因烟草的SOD平均活性是非转基因烟草对照的1．17倍，各转基因烟草的盐害指数也低 于非转基因对照。 关键词eⅢ1A基因；烟草；盐胁迫；旱胁迫 东北林业人学坝lj学位论义 Abstract 111is waSaimedtoobtain廿1eeIFlA isa resistallce gene study 6rom死m甜玩印，thatdrougjlt aIldSaltt01e舳ce toclone“硫ome Vector pla北a11d pl枷expressionpROK II．Ei曲t)，-nine shootSwere tobaCco 舷矾口，彬忙砌一resistallt obtamed矗．om昀nsgemc transfonnationand7excellentl血es PCRexaminationaIld systems wIere州删to PCR．Sou：出em matall were res山tsof