生态循环水养殖池塘微生物群落结构特征初步分析.pdfVIP

上海海洋大学硕士论文 生态循环水养殖池塘微生物群落结构特征初步分析 摘 要 生态循环水养殖池塘是将人工湿地和养殖池塘有机结合的一种新型的养殖模 式，在未来具有良好的发展前途。池塘中的微生物组成对于生物监测和生物修复 具有重要的意义，淡水生境中存在大量不可培养的微生物，使得传统的培养技术 方法无法对微生物群落结构的多样性进行深入而全面的研究，而分子生物学的发 展则提供了一种有效手段。为了探究系统中的微生物群落结构组成特征，为该新 型水产养殖系统提供一定的科学依据。本文利用PCR．DGGE方法对此系统中水样 和底泥样中的微生物群落结构进行了分析。 在2008年的6月到lO月，每月采集五个循环塘和一个对照池塘的水样和底泥 rRNA 样品，提取DNA，扩增其16SV3区。在变性剂梯度为20％--50％，电压80V， 电泳时间12小时的条件下DGGE条带的分离效果最好。 水样的DGGE图谱显示了较高的微生物丰度，且样本在空间和时间上均有较 one软件包分析 大的差异，具体表现在条带的数量、位置及亮度的不同。Quantity 结果显示了对照塘不同于循环塘的微生物群落结构，说明生态循环水养殖在一定 程度上改变了池塘的微生态环境，而这种改变主要是通过人工湿地的净化作用来完 两条蓝细菌特定分布在对照塘中。主成分分析证明了对照塘与循环塘微生物群落结 构组成的差异性，典型对应分析结果则证明溶解氧对于微生物群落组成的相关程度 最大，其次为氮磷水平。 底泥微生物的DGGE显示了29条不同类型的条带，群落结构较为单一，说明 底泥中的微生物丰度并不是很高，且样本在空间和时间上差异性亦不大，菌群结 构相似程度比较高，微生物群落结构基本恒定。选取其中9条稳定的条带进行割 析表明，影响池塘水样微生物群落结构的主要环境因子对底泥依然起到作用。 16SrRNA 关键词：生态循环水养殖池塘；微生物群落结构；DGGE； 上海海洋大学硕士论文 Microbial Structureof Primary Community Analysis ’ Eq uacultureaculturePlgons A：lnulatinl：Aqltalucrtcer-ocEsdor ABSTI认CT areanew model．T11is aquaculture Eco-recirculatingponds aquaculture system theconstructedwetlandsand integrates aquacultureponds，havebrightdevelopment futureunderthe situation．Inordertoresearchthestructureofmicrobial present communitiesinthis ascientificbasisfor new system．provide this method was to waterandsedimentfromthis appliedstudy system． Waterandsedimentwerecollectedfromfive