氨曲南含量和有关物质测定方法的研究.docVIP

论文摘要 目的：对氨曲南原料药含量和有关物质测定方法的实验研究。建立灵敏度高、准确度高、简便快捷的含量和有关物质分析方法，并考察所建立的液相色谱系统对氨曲南进行含量和有关物质检测的适用性，为更准确地评价氨曲南的质量提供可靠的手段。 方法：本文参照USP35氨曲南含量及有关物质检测方法采用外标法氨曲南含量及各杂质含量 目录 一、前言 4 二、 4 三、 .................................................................................................5 （一）色谱条件 5 （二）溶液配置 5 （三） 5 四、方法验证内容 （一）系统适应性 6 （二）精密度 （三） ..10 （四）溶液稳定性研究 12 （五）耐用性 13 五、典型图谱 15 六、结论 7 七、参考文献 17 一、前言 氨曲南作为一种单酰胺环类的新型β－内酰胺抗生素。在1978年从美国新泽西州土壤菌紫色杆菌Chromobacterium violaceum的培养液中首先发现，现已用合成法制得。 结构式： 二、系统配置和相关试剂、样品 方法描述 （一）色谱条件 色谱柱：Waters (Bondapak，C18，3.9 mm×300mm，10(m 缓冲液：6.8mg/ml的磷酸二氢钾水溶液，用1M的磷酸调节pH至3.0 流动相：缓冲液－甲醇（4：1） 流速：1.5ml/min 检测波长：254nm 进样量：10(l 柱温：25℃ 进样器温度：5℃ 运行时间：主峰保留时间的至少4.5倍（样品溶液） （二）溶液配制（备注：系统适应性溶液、标准溶液和样品溶液在5℃避光保存，以避免氨曲南Z-异构体（即氨曲南）异构转化为氨曲南E-异构体。） 系统适应性溶液：取氨曲南标准品和氨曲南E-异构体各适量，准确称取，用流动相溶解并定量稀释制成浓度均为1mg/ml的混合溶液。 标准溶液：准确称取50mg氨曲南标准品于50ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。 样品溶液：准确称取50mg氨曲南样品于50ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。 （三）系统适应性及操作步骤 进样空白（流动相）至少1次，应无干扰峰。进样系统适应性溶液，氨曲南和氨曲南E-异构体的相对保留时间分别为1.0和1.8， 其分离度至少为2.0，氨曲南峰的拖尾因子为不超过2；连续进样5次标准溶液，主峰面积的RSD应不得超过2.0%。系统适应性符合要求后，进样样品溶液，记录色谱图。 按下式计算样品中氨曲南（C13H17N5O8S2）的湿计含量： （PCs/Cu）×（ru/rs）× F×100% 按下式计算样品中氨曲南（C13H17N5O8S2）的无水无残溶计含量： 湿计含量/(1-水分-残溶) 按下式计算样品中各已知杂质（见下表）、其他单个杂质和总杂质的含量： （PCs/Cu）×（ri/rs）× F×100% 式中：Cu，Cs分别为样品溶液与标准溶液的配制浓度（mg/ml）； rs为标准溶液中氨曲南的峰响应平均值； ru为样品溶液中氨曲南的峰响应值； ri为样品溶液中相应杂质的峰响应值； P为氨曲南对照品的效价，(g/mg； F为单位转换因子，0.001mg/(g。 名称 相对保留时间（RRT） 开环氨曲南和开环去硫酸氨曲南 0.55 氨曲南（Z-异构体） 1.0 去硫酸氨曲南 1.6 氨曲南E-异构体 1.8 氨曲南乙酯 3.9 四、方法验证内容 （一）系统适应性 标准溶液：精密称取氨曲南标准品（49.8mg、49.9mg）分别至50ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，混匀。 系统适应性溶液：称取E-异构体标准品10.06mg，氨曲南标准品10.04mg至10ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度。 进样溶剂（流动相）、系统适应性溶液和5针标准溶液，记录峰响应值。实验结果见表1 表1 系统适应性结果 序号 峰面积 图谱编号 1st 8729401 2012-05-15 17：18：09 CST 2nd 8735053 2012-05-15 17：59：08 CST 3rd 8784993 2012-05-15 18：39：53 CST 4th 8835988 2012-05-15 19：20：39 CST 5th 8822756 2012-05-15 20：01：27 CST 平均值 8781638.2 / RSD(%) 0.56 / 分离度（R） 9.6 2012-05-15 16：3