高效液相色谱法测定合成液中甲基橙皮苷含量的研究.pdfVIP

高效液相色谱法测定合成液中 甲基橙皮苷含量的研究 严绍华。 摘要：目的：为控制甲基橙皮苷的合成反应情况，建立甲基橙皮苷的含量测定方法。 1．t 方法：采用ODS色谱柱(150×4．6，5 n1)，以甲醇．水．醋酸(50：50：1)为流动相，流 la la 果：方法的精密度良好(RSD0．72％n=6)；在4．72 g／mL-118g／mL浓度范围内线 9)；加样回收试验中回收率为100．4％，RSD为1．96％。结论： 性相关良好(r=O．999 本法适用于甲基橙皮苷合成过程的监控，方法简单、准确、快速。 关键词：甲基橙皮苷含量测定HPLC 甲基橙皮苷是一种很好的营养增补剂，可作为色素和食品添加剂，广泛使用于各 种食品、化妆品以及药品之中。我国的国家药品标准中已收载了甲基橙皮苷原料及部 分制剂，但采用紫外分光光度法测定含量。由于甲基橙皮营的原料为橙皮苷，其巾含 有两个酚羟基，而甲基化试剂和这两个酚羟基均可发生反应，从而生成副产物，造成 收率降低，使进一步纯化步骤变得复杂，为了更好的监控合成过程，冷文建赢了HPLC 法测定合成液中甲基橙皮苷的含量方法，并对合成过程甲基橙皮苷的含量变化进行了 监控，对于甲基橙皮苷的反应过程有了进一步的了解。 1．仪器与试剂、试药 仪器：岛津Lc一10Avp高效液相色谱仪，754PC型紫外分光光度计。 试剂、试药：甲基橙皮苷对准品(中国药品生物制品检定所，批号：111580．200503)， 甲醇为色谱纯，其它为分析纯。 2．实验方法与结果 2．1色谱条件与系统适用性 um)，流动相：甲醇-水．醋酸(50：50：1)， ODS色谱柱(Aichrombond．AQ，150×4．6，5 流速1．0mL／min，柱温：35℃，检测波长：282nm 2．2对准品溶液的制备 精密称取甲基橙皮苷对准品11．8mg置于50mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。 作为对照储备液。精密吸取对照储备液1．0mL置于lOmL量瓶中，加水定容。进样10 IlL，记录色谱图，结果见图la。 2．3样品溶液的制备 ’作扦：四川曲峰天然药业有限公司 邮编：611130电话 73 OraL置于lOOmL量瓶巾，加水稀释至刻度，摇匀。精密 精密吸取Jfl牡橙皮苻介成液1 吸取hnLJ·50mL最瓶L}l，加水至刻艘，摇匀。进样10uL，记录色谱图，结果见图 lb。 2 4线性关系考察 72p 精甯吸取上述刘照储备液，加水稀释成一系列小同的浓度(4 g／mL、944“g／mL、 236“g／mL、472¨g／mL、94 基橙皮许对准品浓度为横坐标，峰面秘为纵坐标，得标准曲线回归方程： A-92004C+3270 u 9999)。结果表明，甲基橙皮苷在4．72～118 8(r=0 g／mL的浓度范围内 与峰面积有良好的线性关系。 a．对准品 b．供试品 图1甲基橙皮苷的HPLC图 2 5精密度实验 0mL置于100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。精密 精密吸取I_基橙皮韵合成液1 uL，重复进样6次，测 吸取imL于50mL量瓶。h☆II水至刻度，摇匀。吸取此液lo