伤害性信息传入诱导大鼠海马NOS表达及NO生成增加.pdfVIP

中文摘要 一氧化氮(nitrc oxide，NO)是中枢神经系统内重要的信 息分子，其在中枢痛调制方面的作用已有一些研究，例如： oxide 小鼠侧脑室微量注射NO合酶(nitresynthase，NOS) ester, 抑制剂硝基左旋精氨酸甲酯(N-nitro—L-argininemethyl L-NAME)后表现明显的镇痛效应，这种镇痛作用可被静脉注 射L．精氨酸(L。arginine，L-Arg)逆转；而也有作者报道， 脑室内注射L．Arg也可产生明显的镇痛作用，而NOS抑制 剂可有效拮抗该效应。可以看出，这些研究结果并不一致。 中枢内多个核团均存在NOS阳性神经元，不同核团在痛调 制方面的作用并不相同，所以脑室内给药不能反映某一核团 中NO的作用。海马内存在着NOS阳性神经元，当外周伤 害性信息传入时，海马内NOS表达是否发生改变，尚未见 报道。 因此，本研究观察了大鼠甲醛炎性痛时，海马NOS活 性表达的变化，并观察了其区域分布特征和时间特征。在此 基础上，鞘内给予NMDA受体拮抗剂MK．801，观察其对甲 醛诱导的海马NOS活性表达及NO含量的影响。 1甲醛炎性痛时大鼠海马NOS表达及NO含量的变化 随机分为6组，分别为：①对照组，②甲醛6h组，③甲醛 12 h组。 h组，④甲醛24h组，⑤甲醛48h组，⑥甲醛72 每组14只动物，其中7只用于观察NOS的表达，7只用于 观察NO含量的变化。其中对照组不加任何处理，直接多聚 甲醛灌注固定、取材或直接断头取材：甲醛6h、12h、24 h、48 h、72 h组分别于注射甲醛后不同时间，多聚甲醛灌 注固定、取材或直接断头取材。用NADPH-d组织化学法观 中文摘要 察大鼠海马NOS表达的变化；应用硝酸还原酶法测定NO 终产物(N03-／N02-)的含量来反映NO含量的变化。 NADPH．d阳性结果的观察测定，从每例动物脑组织切 片中随机抽取10张切片，于光学显微镜下进行观察。分别 计数海马CAl、CA3区和DG的NADPH-d阳性神经元数目。 借助HPLAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统软件，分 灰度值，数值越小，染色越深。 结果发现，正常对照组大鼠，海马内分布着～定数量的 NADPH-d阳性神经元，这些NADPH．d阳性神经元胞浆及突 起可被染成蓝色，胞核淡染，散在分布于CAl、CA3区及DG 各层，细胞数量均较少，染色较浅。足底注射甲醛6h后， 海马内各区及齿状回NADPH。d阳性神经元数量均明显增加 (P0．01)，染色明显加深，即灰度值明显降低(P0．01)， 并且海马组织中NO含量显著增加(PO．01)；海马中NOS 活性表达增加及NO含量增加以注射甲醛后12h最为明显 (PO．01)；注射甲醛后48 h，NADPH．d阳性神经元数量、 染色深度及海马NO含量均有所降低；至72h降至对照组水 平。两侧海马各区及齿状回比较，无论阳性神经元数量，阳 性神经元染色深度及海马组织NO含量均无显著性差异。 以上结果表明，甲醛炎性痛可诱导海马NOS活性升高， NO含量增加，提示外周伤害性信息可以上传入海马，并引 起海马神经元内NO产生增多。 2鞘内注射MDA受体拮抗剂MK-801对甲醛炎性痛大鼠 海马NOS表达及NO含量的影响 中文摘要 h组，③甲醛 随机分为4组，分别为：①对照组，②甲醛12 +生理盐水组，④甲醛+MK-801组。每组14只动物，其中7 只用于观察NOS的表达，7只用于观察NO含量的变化。对 照组不加任何处理，直接多聚甲醛灌注固定、取材或直接断 头取材；甲醛12h组、甲醛+生理盐水组、甲醛+MK罐Ol组 均于注射甲醛后12小时后多聚甲醛灌注固定、取材或直接 断头取材，其中甲醛+生理盐水组、甲醛+MK-801组分别于 注射甲醛前1