烟草赤星病菌拮抗菌的筛选及发酵条件研究.pdfVIP

第七届全国新农药创制学术交流会论文集 烟草赤星病菌拮抗菌的筛选及发酵条件研究 何莲k3欧晓明L3黎定军2 (’湖南化工研究院农药剂型与应用系统研究所，长沙，410007；2湖南农业大学生物安全科技学院，长 0007) 沙410128；’国家农药创制工程技术研究中心，长沙，41 摘要：从烟草．辣椒和番茄根际土壤中分离到2株拮抗赤星病的放线茵，对峙培养发现其中1菌株 SZF2对烟草赤星病，烟草黑胫病．烟草炭疽病，水稻恶苗病和棉花枯萎病具有较好的拮抗作用．对其进 行发酵条件的优化，认为选用5号培养基(其主要成分为淀粉209，氯化钠0．59，硝酸钾19，硫酸亚铁 大的情况下，抗菌物质的抑茵活性最高． 关键词：烟草赤星病；拮抗菌：筛选；发酵条件 烟草赤星病是成熟期危害烟叶的主要病害之一，直接影响烟叶的产量和品质，给烟草生产带来巨大的 经济损失。近十年来，随感病烟草品种的大面积种植，烟叶成熟度的提高，施肥量(特别是施氮量)的增 加以及其它生产技术的改进等因素的影响，烟草赤星病的发生日趋严重。分离、筛选出对赤星病菌具有良 好抑制作用和防治效果的拮抗菌是实施生物防治的一项重要工作．近年来一些学者进行了生物防治此病害 的研究‘1．本研究针对烟草赤星病从土壤中筛选拮抗菌，并对其发酵条件进行了优化研究，以期为烟草 赤星病的防治和新型生物制剂的研究奠定科学基础。 1材料与方法 1．1材料 1．1．1土样的采集从浏阳、张家界桑植、常德各地的健康烟草、辣椒、番茄地土壤的耕作层取样， 放置在5℃冰箱，待分离。 1．1．2供试病原菌烟草赤星病菌(Alternaria alternata(Fries)Keissler) 1．I．3培养基基础培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)，分离筛选用培养基为高氏一号培养基； 、 拮抗试验用培养基为PDA；发酵试验用培养基：6种不同配方的液体培养基。 1．2方法 1．2．1拮抗菌的分离 滴加到带有抑制剂(重铬酸钾)的高氏一号培养基平板上，涂匀，将培养皿放在28(2的温箱反转培养。 1．2．2拮抗微生物的筛选 采用对峙培养法．将直径为6mm的烟草赤星病菌菌丝块接种于PDA平板中央，在离病菌2．5cm一- 分离物． 1．2．3对病原茵的抑制作用 402 第七届全国新农药创制学术交流会论文集 发酵液对赤星病抗病活性测定．将筛选到防效较好的菌株接种于高氏一号培养液中，28C下摇床培养 叉法测量菌直径，按下列公式求出抑制率： 抑制靴产篱慧嚣蔷鬻川。 1．2．4发酵培养基的选择 本研究选用6种不同发酵培养基(表I)，采用菌盘法测定SZF2的抑菌作用，并以此表示该菌株在 不同培养基中抗菌物质的积累量，将制备好的发酵滤液和PDA培养基按1：5的比例混匀，倒平板，接烟 草赤星病病菌菌盘，重复3次，以加无菌水的PDA培养基做对照。在28℃条件下培养7d，测定菌落直径， 计算抑菌率． 表1 6种液体培养基成分 培养基 成分 l 燕麦片209，碳酸钙59，璇萄糖209，水1000mL 2 mL 牛肉浸膏109，蛋白胨109，氯化钠59，水1000 3 mL 蛋白胨109，牛肉浸膏109，甘油109，水1000 4 mL 蛋白胨59，磷酸氢二钾lg，硫酸镁O．59，硫酸亚铁O．Olg，蔗糖309，水1000 5 mL