柱后衍生—高效液相色谱法测定保健食品、强化食品.docVIP

?? ??? 高效液相色谱法测定油脂类保健食品中的虾青素 刘泰然 赵海燕 罗仁才* (北京市疾病预防控制中心，北京 100013) 摘 要： 建立高效液相色谱法测定油脂类保健食品中虾青素的方法。样品经乙腈提取，浓缩后以Dikma C18(4.6×250mm, 5μm）钻石Ⅱ柱分离，乙腈-水为流动相梯度洗脱，流量为1.0mL/min，（柱温为35 ℃），通过紫外检测器在波长479nm处检测。结果虾青素的质量浓度在30~300mg.L-1范围内呈线性；回收率在90.0%~96.7%之间；相对标准偏差(RSD)2.13~2.81%（n=6）。测定下限为0.21μg/ mL 。结论本方法快速、灵敏、准确可靠、重现性好,适用于油脂类保健食品中虾青素的测定。 关键词： 高效液相色谱；虾青素； 抗氧化；油脂类保健食品 中图分类号：O6 Determination of Astaxanthin in lipid health foods by HPLC Liu Tairan，Zhao Haiyan，Luo Rencai* (Beijing Center for Disease Prevention and Control， Beijing 100013，China) Abstract：Objective An analytical method for determination of astaxanthin( ASX) in lipid health foods by high performance liquid chromatography coupled with diode array detector(DAD)was developed. Method The samples were extracted 、vaporized ， then the extracted solutions were separated on C18 column by using a mixture of acetritile(A)- water(B) as the mobile phase，the flow rate was 1.0 mL /min. Results Good linearity of the calibration curve between the peak area and the mass of astaxanthin was obtained （r=0.9999）; the rate of recoveries were 90.0%~96.7%。the relative standard deviations （n=6）were 2.13~2.81%．Conclusion The proposed method is simple、 rapid、 precise、accurate、easy to apply ,and it can be used for determination of astaxanthin in lipid health foods. Key words：high performance liquid chromatography；astaxanthin；antioxidation；lipid health foods 虾青素（3，3′-二羟基-4，4′-二酮基-β，β′-胡萝卜素的一种胡萝卜素 。抗氧化E的550[3]，动物试验表明, 虾青素可以清除二氧化氮、硫化物、二硫化物, 有效的抑制自由基引发的脂质过氧化，故而在食品添加剂、水产养殖、化妆品、保健品和医药工业方面有广阔的应用前景，因此建立快速、简便、准确的测定虾青素的方法十分必要。 目前报道的虾青素测定方法有紫外分光光度法 [4]-[5] 、高效液相色谱法[1]、[6]，但这些方法都适用于藻类样品，未见有关于测定油脂类保健食品的文献报道。本工作采用乙腈提取，浓缩后以Dikma C18(4.6×250mm, 5μm）钻石Ⅱ柱分离，乙腈-水为流动相梯度洗脱，高效液相色谱-紫外检测方法测定油脂类保健食品中的虾青素含量，适用于油脂类保健食品中的虾青素的测定。 1 试验部分 1.1仪器与试剂 Waters- ailiaince -2695分离系统(配Waters-2996二极管阵列检测器）， 超纯水发生器（Millipore），乙腈(色谱纯)，BS 323分析天平(德国Sartorius公司）2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚进样量 时间/min 流量/(mL.min-1) 流动相流量?/% 乙腈(A)/% 水(B)/% 0 1.0 95 5 10 1.0 100 0 12 1.0 95 5