2014年第六讲 生物技术在农业中的应用.pptVIP

微卫星标记的特点 微卫星标记的最大优点在于它具有大量的等位差异，而这种变异在生物群体中是大量存在的，通过简单的PCR反应即可直接检测到已知的特定染色体位点。它具有一般PCR操作简单、快速、成本低的特点，又拥有RFLP稳定可靠，特异性强和共显性的优点。 但是，微卫星标记必须依赖测序设计引物，引物的开发比较困难，所需技术复杂，周期长，费用高，对大多数物种来说现已发表的引物数目相当有限，难以满足各方面的需要。 AFLP AFLP即扩增片段长度多态性。AFLP是RFLP与PCR相结合的一种分子标记技术，其基本原理是对基因组DNA限制性酶切片段的选择性扩增，扩增片段通过高分辨率的测序分析胶（变性聚丙烯酰胺凝胶）进行电泳分离检测，DNA多态性即以扩增片段的长度和数量不同而被检测出来。 AFLP的特点 AFLP是RFLP和PCR有机结合产生的一种分子标记技术，既有RFLP的可靠性，也具有PCR（如RAPD）的灵敏性，可产生丰富而稳定的遗传标记，快速高效。 但是，AFLP主要属于显性标记，且操作比SSR和RAPD复杂，费用较高，还可能需要同位素或非同位素标记引物。 遗传多样性研究 基因型不同的品种，或不同亲缘关系的物种，基因组内核苷酸序列存在差异。当使用同一引物对不同基因组体外扩增时，其扩增产物（DNA片段）的大小、数目不同，亦即扩增产物表现出多态性。 当使用一系列不同的引物扩增时，多态性更加丰富。反映了被测材料的遗传多样性。进一步通过相关分析、聚类分析等数量遗传分析手段，还可对不同亲缘物种间的分类、遗传距离、系统发育、亲缘关系进行研究。 分子标记辅助选择 分子标记辅助选择（Molecular Marker Assisted Slection）：即是依据与目标基因紧密连锁的分子标记来对目标性状进行间接选择。 分子标记辅助选择的优点： （1）对目标性状的选择不受基因表达和环境因素的影响； （2）可在早代和植株生长的任何阶段进行，大大缩短育种年限； （3）在分离世代能够快速地鉴定植株的基因型，不受基因显隐性的影响； （4）可以打破目标基因与不利基因的连锁。 品种（杂种）真实性鉴定 通过检测远缘杂种或体细胞杂种中特异性分子标记的有无，可以鉴定杂种的真实性。 通过建立品种（组合）的DNA指纹图谱档案，用来鉴定品种（组合）纯度，为种子质量提供可靠资料，或用来保护品种（组合）专利。 现代生物技术与养殖业 动物转基因技术与分子育种 胚胎工程 生物反应器 动物转基因技术 动物转基因技术是在基因工程、细胞工程和胚胎工程的基础上发展起来的。 转基因技术利用基因重组，打破动物的种间隔离，实现动物种间遗传物质的交换，为动物性状的改良或新性状的获得提供了新的方法。 转基因动物的概念 借助基因工程技术将外源目的基因通过生殖细胞或早期胚胎导入动物个体的染色体上，在其基因组内稳定地整合表达，并能遗传给后代的一类动物称为转基因动物。 即通过转基因技术将人们所需要的目的基因导入动物受精卵内，使之与动物本身的基因整合在一起，随着宿主动物细胞的分裂而外源基因也随之复制，并在体内得到表达，其特性能稳定遗传给后代，即转基因动物的后代也能生产外源基因的表达产物。这类带有外源基因并能表达其产物的动物称之为“转基因动物”或称“工程动物”。 动物转基因的步骤 1.外源基因的获得与鉴定 2.外源基因导入受精卵 3.转基因受精卵移植到母体子宫 4.胚胎发育 5.检测新基因的遗传性状和表达能力 转基因技术在动物生产上的应用 转基因鱼：转基因金鱼、鲫鱼、鲤鱼、泥鳅、鳟鱼、大马哈鱼、鲶鱼、罗非鱼等。 转基因家禽：转基因鸡 转基因家畜：转基因猪、牛、羊、兔等 分子标记与动物育种 构建分子遗传图谱和基因定位 基因的监测、分离和克隆 亲缘关系的分析 DNA标记辅助选种 性别诊断与控制 突变分析 胚胎工程 胚胎工程是对哺乳动物的排卵、受精、胚胎早期发育等繁殖过程进行人工操作的现代生物技术。 胚胎工程技术主要包括冷冻保存技术、胚胎移植、体外生产胚胎、胚胎克隆、性别鉴定和转基因技术。 人工授精与精液的冷冻保存技术 人工授精就是利用合适的器械采集公畜的精液，经过品质检查、稀释或保存等适当的处理，再用器械将精液适时地输入到发情母畜的生殖道内，以代替公母畜直接交配而使其受孕的方法。 胚胎移植 将一头良种母畜配种后的早期胚胎取出，移植到另一头同种的生理状态相同的母畜体内，使之继续发育成为新个体，又称受精卵移植。 体外胚胎生产 将原来在输卵管进行的精卵结合生成胚胎的过程人为地改在体外进行。 意义： 提供大量胚胎进行商业性胚胎移植；为克隆