丙泊酚对肢体缺血再灌注继发肺损伤保护作用的实验研究.docVIP

丙泊酚对肢体缺血/再灌注继发肺损伤保护作用的实验研究 工作单位：山西医科大学第二临床医院麻醉科 邮　　编：030001作者姓名：马平 田蔼萍 摘 要 目的：本实验利用大鼠下肢缺血/再灌注继发远隔器官肺损伤模型，观察临床麻醉浓度的丙泊酚对大鼠下肢缺血/再灌注后肺组织脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量、抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷光甘肽（GSH）含量，组织诱导型一氧化氮合酶 (iNOS )及细胞间黏附分子（ICAM-1）表达的影响，结合组织病理改变，进一步探讨丙泊酚对肢体缺血/再灌注后远隔器官肺损伤的保护作用及其机制，为丙泊酚在脏器保护方面的临床应用提供实验支持。 方法：健康雄性SD大鼠 24 只，体重250-300g。25％的乌拉坦腹腔注射（1.2 g ·kg-1 ip.）麻醉，随机分为3组：(l)假手术组（sham组，n=8），只进行手术操作不做其他处理；(2)单纯肢体缺血/再灌注组（I/R组，n = 8），双下肢缺血3小时，再灌注4小时；(3) 丙泊酚干预组（I/R+P 组，n=8）于开放前10分钟静脉注射丙泊酚（用0.9％盐水稀释至0.5%）5mg·kg-1，随后持续输注 10mg·kg-1·h-1，sham组、I/R组输注等量生理盐水lml·kg-1，随后2ml·kg-1·h–1维持。实验结束，颈动脉放血处死大鼠，取肺组织测定丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷光甘肽（GSH）含量及肺含水量，观察组织形态学改变及组织诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)、细胞间黏附分子（ICAM-l）的表达情况。 结果： 1、肺组织MDA含量变化（表1）：I/R组肺组织MDA的含量（1.35±0.468nmol/mgprot）较sham组（0.83±0.16nmol/mgprot）明显增高(P0.01)；与I/R组比较，I/R+P组肺组织MDA的含量（0.856±0.275nmol/mgprot）也明显降低（P0.01）;I/R+P组与sham组相比肺组织中的MDA含量无差异性(P0.05)。 2、各组织SOD活性改变（表1）：sham组肺组织SOD活性为12.681±1.732NU/mgprot,I/R组为7.512±2.153NU/mgprot,与sham组相比明显降低（P0.01）,I/R+P组肺组织SOD活性为9.926±2.568NU/mgprot，较I/R组有所增高（P0.05）,但仍然低于sham组（P0.05）。 3、谷光甘肽（GSH）含量变化（表1）：I/R组肺组织GSH的含量（21.63±4.23 mg/mgprot）较sham组（30.25±5.21mg/mgprot）明显减少(P0.01)；与I/R组比较，I/R+P组肺组织GSH的含量（27.35±6.12mg/mgprot）明显增加（P0.01）;I/R+P组与sham组相比肺组织中的GSH含量无差异性(P0.05) 4、肺含水量（%）改变：sham组肺含水量为（62.8±8.35）%,I/R组为（76.2±6.23）%,I/R+P组为（68.9±7.12）％。I/R组与sham组相比肺含水量明显增加（P0.01）；而I/R+P组较I/R组有所降低（P0.05）；I/R+P组与sham组比较，差异无显著性意义（P0.05）。 4、组织病理变化：(1)肺组织光镜观察，I/R组肺间隔增厚，间质中有大量中性粒细胞浸润，局部肺泡出现不张、肺泡水肿。I/R+P组肺间质仅轻度增宽，少量中性粒细胞浸润无肺不张或肺出血。 5、组织中iNOS、ICAM-1的表达（表2、3）：免疫组化切片以平均光度、平均灰度、阳性面积、阳性单位为指标进行半定量分析。I/R组iNOS、ICAM-1表达阳性的细胞较sham组明显增加（P0.01），I/R+P组肺组织iNOS、ICAM-1表达阳性的细胞较I/R组明显减少（P0.05）。 结论：丙泊酚对大鼠下肢缺血/再灌注继发远隔器官肺损伤具有一定的保护作用，其机制可能与清除氧自由基，进而减轻氧自由基对机体的过氧化损伤及继发性炎症损伤有关。 关键词：丙泊酚，缺血/再灌注，氧自由基，细胞间黏附分子-1，一氧化氮合酶。 GROUP MDA(nmol/mgprot) SOD(NU/mgprot) GSH（mg/mgprot） sham 0.830±0.16 12.681±1.732 30.25±5.21 I/R 1.35±0.468** 7.512±2.153** 21.63±4.23** I/R+P 0.856±0.275* 9.926±2.568*△ 27.35±6.12* 表1：各组肺组织MDA、SOD、GSH含量变化（±s） ***P0.01 vs sham group, *P0.05 vs I/R group,