蛋白的检测的方法.docVIP

使用Lumio?技术快速检测体外表达的蛋白质 简介众所周知，蛋白质体外合成系统是一种快速、有效地表达蛋白质的方式。然而，通常体外基因的表达会产生一些阻遏问题。相比之下，Invitrogen的Expressway?Plus表达系统提供了一种直接、简便的方法用于获得高产量的功能性活性蛋白质。现在，我们推出一种改进的Expressway? Plus系统，即使用Lumio?技术来快速检测蛋白质产物。Lumio?技术是基于FLAsH( Fluorescein Arsenical Hairpin)技术，是一种联胂的荧光素衍生物和四半胱氨酸序列的耦合物（ HYPERLINK /newproducts/main/Lumio.htm \l F1#F1 图1）。该四半胱氨酸序列由“Cys-Cys-Xaa-Xaa-Cys-Cys””组成，其中的Xaa指非半胱氨酸的氨基酸。我们通常选择的Xaa-Xaa是Pro-Gly，因为有报道指出pico-molar的离解常数与FLAsH一致。 图1 Lumio?试剂与四半胱氨酸序列结合的示意图 Lumio?试剂处于非结合状态时基本上无荧光性。然而，通过与四半胱氨酸序列结合，Lumio?试剂变得具有高度的荧光性。当Lumio?试剂与四半胱氨酸标记的肽或蛋白质结合，在505nm处有吸收峰，并且，在528nm处有最大的绿色荧光发射。配合使