不同转染方式对腺病毒介导的基因转染效率的影响.pdfVIP

孔 霞等．不同转染方式对腺病毒介导的基因转染效率的影响 · 干细胞专题 · 不同转染方式对腺病毒介导的基因转染效率的影响 孔 霞 ， 郭凌郧 ， 张 蕾 ， 郑 飞 ， 杨建业 ， 黄永章 ， 唐俊明 ， 王家宁 (郧阳医学院附属人民医院 临床医学研究所 ；心内科，湖北 十堰 442ooo) [摘 要] 目的：研究携带绿色荧光蛋白(GreenFluorescentProtein，GFP)基因的重组腺病毒在大鼠骨髓间充质干 细胞(MSCs)中的表达。方法：将纯化的GFP重组腺病毒分别用单次转染和多次转染两种不同方法转染MSC，观察 其感染效率和GFP表达水平。结果：培养的MSC呈CD90和CD105强阳性，且具有成骨、成脂肪等多向分化能力 ； 携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒单次转染和多次转染P3代MSC都呈现出浓度依赖性；单次转染在80MOI时 转染效率最高，而多次转染在20MOI时转染效率即已达90％。结论：建立稳定、高效表达Ad．GFP的骨髓间充质干 细胞实验体系，为MSC的标记及示踪奠定基础。 [关键词