Rv2653c在大肠杆菌中的克隆与表达研究论文.pdfVIP

牛 中国防痨协会～ JL004 Rv2653c在大肠杆菌中的克隆与表达研究 李邦印孙卫国程小星孙昌文熊志红王仲元王金河苏锐 (解放军第309医院结核病研究室北京100091) 摘要：目的从H37Rv标准株克隆出结核菌Rv2653c基因并进行表达与初步分析。方法： 阳性克隆进行测序，将正确编码基因克隆到pET24b载体上，在BL21大肠杆菌菌株中以IPTG 诱导表达重组蛋白。以金属螫合层析初步分离纯化重组蛋白，采用westernblot方法对重 组抗原进行抗原性初步分析。结果首先获得了重组的Rv2653c编码的蛋白，表达产率不低 于20％，初步纯化纯度约90％，以人血清进行的westernblot分析发现，Rv2653c重组蛋白 有较好的抗原性。结论获得了Rv2653c重组蛋白为进一步寻探讨其功能及应用价值奠定基 础。 关键词：结核分枝杆菌；大肠杆菌；克隆；表达 通讯作者：程小星(xc36cn@163．corn) and of Rv2653cof11．TBinE．coli