蚯蚓抗肿瘤成分的分离与研究论文.pdfVIP

蚯蚓抗肿瘤成分的分离与研究 张玉，连桂芳，张治国 (南京农业大学生命科学学院江苏南京210095) 人们对蚯蚓抗肿瘤研究的兴趣主要源自于：一、王克为教授等11J，早期对蚯蚓提取物所进行的大量 药理与临床研究、表明它具有抗肿瘤的确切效果。二、蚯蚓是常用的传统中药，以至作为食品或优质的 动物性饲料也证明它口服是安全的。三、至少已证明蚯蚓纤溶酶的个别同工酶、有10．15％可完整地经 肠道上皮吸收并在体内保持生物活性【2J，它提示蚯蚓活性蛋白成分口服用药的可能。本文试图从相关的 研究资料中，弄清蚯蚓抗肿瘤的有效成分究竟是什么，抗肿瘤的机制是什么，对髓系瘤细胞的增殖有无 促进作用等基本问题。 1．蚯蚓抗肿瘤成分的研究 上世纪80．90年代，王克为教授掣l】一系列抗肿瘤试验的材料绝大部分采用地龙胶囊912，但未阐 明试验材料的成分。据接触到的实物判断，主要成分应该是蚯蚓粗提物。该研究室的韩苇、王克为等【3】 报导，地龙胶囊912的水溶液经SephadexG50凝胶层析，第1蛋白质组分可显著抑制MGc803胃癌细胞 3H．TdR参入并使细胞形态发生改变；该组分经560C水浴0．5h．仍保持抗肿瘤作用。在另外的试验中， 发现地龙胶囊的抗肿瘤的成分存在于透析外液中(透析袋截留分子量20000)，且具有一定的耐热性；而 l引。 透析内液对移植瘤S180无抑制作用14J 白质浓度大于120mg／L时对小鼠EC腹水瘤细胞、腹水型S180瘤细胞具抑制作用。 G75凝胶层析得到一种蚯蚓提取物，经FPLC上Mono 江尚元17J通过盐析、Sephadex Q柱分析、它 含有11种具纤溶活性的同工酶。该具纤溶活性的蚯蚓提取物添加量为lmg／ml时在体外抑制Hela细胞、 人卵巢癌细胞。 26／60 谢江碧等【8J将赤子爱胜蚓的PBS抽提液用冷丙酮沉淀得丙酮粉，溶解后通过HiPrepTM S．100分子筛凝胶层析，其中B峰体外杀伤癌细胞活性最强、纤溶活性也最高，并可延长S180 Sephacryl 荷瘤鼠的生存时间。该蛋白质组分经1000C煮沸5分钟，抑制肿瘤细胞的活性完全消失；丝氨酸蛋白 酶抑制剂aprotinin、PMSF，能显著抑制它对肿瘤细胞的杀伤活性。 G75凝胶过滤、 何道伟等pJ取赤子爱胜蚓的生理盐水抽提物、分级盐析去核酸和杂蛋白，Sephadex 分别收集相邻的3个蛋白峰、冷冻干燥，其中第Ⅱ峰是纤溶酶活性峰。3组提取物在肿瘤细胞培养液的 87．0％；不具纤溶活性或纤溶活性很低的第1峰、第Ⅲ峰，对2种肿瘤细胞不抑制或抑制率很低且不呈 剂量依赖关系；用纤溶酶活性组分(第Ⅱ峰)给小鼠灌胃，可明显抑制S180移植瘤生长。 贾慧敏等【1 G1∞凝 该蛋白质有效抑制人原发性肝癌细胞BEL．7402、Hela细胞。文章没有说明该蛋白质是否具有纤维蛋白 溶解活性。 Martin 9J从赤子爱胜蚓的体腔液中分离到一种MW=42kDa的蛋白质，它能够溶解各种哺 Bilej等【l 乳动物肿瘤细胞系，但它不同于TNF介导的溶细胞作用也不是通过蛋白溶解作用，它可归纳于调理素 和溶血素作用的范畴。它的分子量与贾慧敏等【lo】分离的蚯蚓蛋白(MW=42．2kDa)相吻合。 CL．6B及FPLC上 袁玲等【11】将蚯蚓的生理盐水抽提液经SephadexG75凝胶过滤，DEAE．Sepharose Mono 作用促使小鼠B细胞性淋巴瘤细胞SRS．B2死亡。 287 G75凝胶层析，其中第1