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微生物的培养与应用
[考纲要求] 1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。
考点一 微生物的实验室培养
1.培养基的分析
(1)据物理状态的不同,培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型( )
(2)培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分( )
(3)在配制培养基时,除满足营养需求外,还应考虑pH、O2及特殊营养物质的需求( )
2.无菌技术(连一连)
3.纯化大肠杆菌
(1)制备固体培养基的流程
→→→→
(2)纯化大肠杆菌的方法
常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
①平板划线法:是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
易错警示 (1)自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同:①自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物,而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物,因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。②含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源,也能作为能源物质,提供能量,如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。(2)配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项:①倒平板的适宜温度是50 ℃左右,温度过高会烫手,过低培养基又会凝固。②平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。(3)平板划线操作的注意事项:①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环。②灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。③划线时最后一区不要与第一区相连。④划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。
1.下列无菌操作中,错误的是( )
A.无菌操作的目的是防止杂菌污染
B.用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒
C.实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行
D.玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭
2.下列是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答:
试剂 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水 用量 5 g 10 g 5 g 20 g 1 000 mL (1)培养基的类型有很多,但培养基中一般都含有水、碳源、____________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是__________________________。培养基配制完成以后,一般还要调节pH,并对培养基进行__________处理。该培养基从物理性质上分类属于____________。
(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是____________和____________________。
(3)假设培养结束后,发现培养基上菌落连成一片,可能的原因是什么?(列举两项)
________________________________________________________________________
1.微生物和动植物营养要素的比较
项目 碳源 氮源 能源 无机盐、水动物糖类、脂肪等蛋白质或其降解物同碳源都需要,种类及功能基本相同微生物 异养型 糖类、脂肪、醇、有机酸等 蛋白质或其降解物、铵盐、硝酸盐、N2等 同碳源 自养型 CO2、碳酸盐等 NH3、铵盐、硝酸盐等 氧化无机物或利用光能 绿色植物 铵盐、硝酸盐光能2.消毒和灭菌比较
比较项目 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 较为温和 部分生活状态的微生物 不能 灭菌 强烈 全部微生物 能 3.两种纯化细菌的方法的比较
项目 优点 缺点 平板划线法 可以观察菌落特征,对混合菌进行分离 不能计数 稀释涂布平板法 可以计数,可以观察菌落特征 吸收量较小,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延 4.培养基的营养构成
(1)各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
(2)不同培养基要满足不同微生物对pH、特殊营养物质及氧气的需求。
考点二 分解尿素的细菌的分离与计数
1.完善土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
(1)分离原理:土壤中细菌之所以能分解尿素,是由于它们体内能合成脲酶,这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。
(2)统计菌落数目:统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。
(3)实验流程:土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察→细菌的计数。
2.判断正误
(1)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素( )
(2)筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源( )
(3)统计样品中的活菌一般用平板划线法( )
(4)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变蓝,
则说明筛选到分解尿素的细菌( )
易错
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