菌株筛选及其发酵生产乙醇研究.pdfVIP

第30卷第4期 太阳能学报 v01．30．No．4 2009年4月 A(了AENERCI^ESOLARISSINICA Aor．。2009 秸秆降解菌株的筛选及其发酵生产乙醇的研究 赵 磊1’2，马 沛1’2，范代娣1’2，骆艳娥1’2，马晓轩1’2 (1．西北大学化工学院，西安710069；2．陕西省生物材料与发酵工程技术研究中心，西安710069) 摘要：用滤纸赫奇逊固体培养基和纤维素固体培养基初筛，再以滤纸无机盐培养基和以羧甲基纤维素为唯一碳 源的刚果红培养基进行复筛的方法，确定出10株降解效果较好的菌，通过对其纤维素酶相关性质及酶活力进行测 定，综合比较降解能力，最终获得6株降解活性较强的菌，其酸性纤维素酶活较强，最优产酶时间为6d，最后采取了 SimultaneousSaccharificafionand 非等温同时糖化发酵法(Nonisothemml neol,ts and Sacchafitication Fermentation，SsF)进行乙醇发酵，结果表明NSSF的乙醇产率大于SSF。 关键词：筛选；降解；木质纤维素；燃料乙醇；发酵 中图分类号：如1352 文献标识码：A 从已发霉腐烂的玉米秸秆、毛巾、枯叶以及玉米地 0前言 土壤中筛选菌株。干玉米秸秆粉是将西安市郊刚收割 利用秸秆生产乙醇，首先要对秸秆预处理，然后 堆积的玉米秸秆粉碎成3nffin以下的颗粒。黑曲霉、绿 进行糖化，最后进行酒精发酵。目前，秸秆的预处理 色木霉以及产朊假丝酵母均由本实验室储藏。 方法主要有4种[1’2]：物理法、化学法、物理化学法、1．2培养基 生物法。糖化过程的关键是获得高产纤维素酶的微 牛肉膏蛋白胨培养基、豆芽汁培养基、PDA培养 生物，据相关报道，具有降解纤维素能力的微生物有 基㈨。 近200种，包括真菌、细菌和放线菌【3J。现有研究降 赫奇逊固体培养基[9】：KH2P041．09、 解纤维素菌株筛选多从土壤，草食性动物的瘤胃中 MgS04‘7H20 0．019、NAN03 0．39、NaClO．19、FeCl3 取样，如佟勇等【31从猪牛粪便的堆肥中分离出嗜 2．59、水1000mL、琼脂209，pH为7．2～7．4。 热嗜碱放线菌；Odenyo【41等从东非豪猪尾肠中分离 滤纸：用1％的醋酸溶液浸泡一昼夜充分除去 出两株厌氧微生物降解细菌。也有一些将表达纤维 淀粉，用碘液检测，没有蓝色产生即可使用，使用前， 素酶的基因克隆到基因工程菌中，如Godbole【51等将 用2％的NaHC03洗至中性，晾干。 T．reeseicbh I在P／ch／a pastods中成功转化并表达。 滤纸赫奇逊固体培养基：将滤纸铺在赫奇逊固 在利用秸秆发酵乙醇方面，研究较多的是SSF[6’71法， 体培养基上面，液面浸过滤纸。 木质纤维素经酸处理后，直接加入微生物或纤维素 CMC—Na培养基[I引：CMC—Na