慢性酒精性胃损害及转化生长因子-α在胃表达.pdfVIP

中文摘要 石 言 长期大量饮酒可引起肝脏、肾脏、神经、心脏、胰腺等多脏器的 功能损害，产生一些特殊的临床表现。但有一些非特异性消化道 症状，如腹胀、食欲不振、恶心等用上述脏器功能异常难以解释，推 测可能与乙醇造成消化道黏膜，尤其是胃黏膜的受损有关。众多 的动物实验研究显示，短期内摄入大量高浓度的乙醇，可造成急性 胃黏膜损害和一些细胞因子的改变，而相对少量、中(或低)浓度 的乙醇长期摄取，对胃黏膜损害和细胞因子变化的研究较少。炜 研究应用乙醇灌胃的方法，建立慢性酒精性胃损害模型，探讨不同 时期胃黏膜的病理改变，以及促进胃黏膜上皮细胞增殖、分化的细 胞因子一转化生长因子一仪(TGF一仅)的变化。 f f实验材料 一、实验动物 雌性Wister系大鼠46只，对照组16只，模型组30只。 二、主要试剂 1．无水乙醇 2．小鼠抗大鼠转化生长因子-d(1：100)，链酶抗生物素．生物 素(SABC)试剂盒及3，3-二氨基联苯胺(DAB)显色试剂。 三、主要仪器 1．石蜡切片机 2．光学显微镜及照相装置 ·1· 3．显微(荧光)图像分析系统 实验方法 一、动物模型 46只大鼠随机分为两组：对照组16只，模型组30只。模型 组给予40％乙醇(89·kg～·day。1)，分三次灌胃至4周末；自第 5周开始，将乙醇浓度增至50％(99·kg～·day。)，分三次灌胃 至8周末；自第9周开始，50％乙醇(109·kg～·day“)分三次灌 胃至12周末。对照组动物给予相同容积的生理盐水，日三次灌 胃。于开始灌胃4周末、8周末、12周末分别处死模型组10、12、8 只及对照组动物5、5、6只。 二、病理学检查 沿胃大弯将胃剪开、冲洗，展平于玻璃板上，置光学显微镜下， 用微尺测量损伤情况，损伤指数计分参考Guth等标准。每隔0．3 em作全胃横向平行系列切块，制成石蜡块。连续切成51a,m的切 片，常规HE染色，光镜下观察其病理改变。以Mascuda等标准进 行损伤程度累计积分。 三、免疫组化ABC法检测转化生长因子吨(TGF-a) 石蜡切片脱蜡至水，灭活内源性酶，抗原修复，加正常兔血清， 复合物20—37。C20分钟，以上各步均以0．01M的PBS充分洗涤。 DAB显色，苏木素轻度复染，显微镜下观察。以细胞浆中有棕黄 色颗粒的细胞为阳性细胞。应用显微(荧光)图像分析系统对选 取视野内TGF一仅免疫组化阳性信号进行分析。 五、统计学处理： 统计学分析采用SPSSl0．0软件，计量资料各组间比较采用 ANOVA检验。 ·2· 实验结果 一、一般状况 模型组大鼠同对照组相比，一般状态差，毛色无光泽，易激惹， 体重减轻(P0．01)。 二、胃组织病理学改变 对照组胃大体标本可见黏膜光滑，HE染色标本镜下黏膜未 见异常。酒精灌胃4周末，胃黏膜点状糜烂、充血水肿、中性粒细 胞浸润；8周末，胃黏膜多发糜烂，主、壁细胞肿胀，数量减少，多种 炎性细胞浸润；12周末，胃黏膜见点状出血，多发糜烂，腺上皮萎 缩，腺体变小，数量减少，淋巴细胞、浆细胞浸润。 三、TGF一“在胃的表达 模型组与对照组相比，胃TGF．d的表达均增加，具有显著性 差异(P0．01)；随着乙醇刺激时间的延长和剂量的不断加大，各 模型组之间胃TGF_0【的表达也逐渐增加(PO．01)。 讨 论 胃是乙醇无需吸收入血而直接损害的器官，因此保持胃黏膜 的完整、减少胃黏膜的损害程度，对减少乙醇导致各脏器的损害至 关重要。短期内大量高浓度的乙醇可导致胃黏膜急性损伤，而慢 性摄取低浓度的乙醇导致胃黏膜损害的研究较少。 在临床上常常看到一些酒依赖者或酒精性肝病患者，出现上 腹饱胀、纳差或各种各样的消化不良症状