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两面针结晶8 的镇痛作用及机制的研究1
1 2 2 2 1 1,*
杨斌 ,伍国俊 ,谭洪川 ,赵琼胡 ,王希斌 ,刘华钢
1. 广西医科大学药学院,广西南宁(530021 )
2.广西医科大学临床医学专业,广西南宁(530021 )
E-mail :hgliu@263.net
摘 要:目的:研究两面针结晶8 的镇痛作用并对其镇痛机制进行初步探究。方法:①采用
热板法、扭体法观察结晶8 的镇痛效果;②采用HPLC 测定小鼠血清及脑组织中的单胺类递
质的含量变化。结果:① 结晶8 高低剂量组均对热板法所至小鼠的疼痛有明显的抑制效果,
能使小鼠血清中的5 -HT 含量减少(P <0.05 或0.01 );②结晶8 低剂量组对小鼠的扭体反
应有明显的抑制效果,能使小鼠脑内的DA 含量减少(P <0.05 )。结论: 结晶8 具有镇痛
作用,而镇痛机制可能与其降低脑内DA 和外周组织5 -HT 含量有关。
关键词:结晶8;镇痛;高效液相色谱;单胺类递质
中图分类号:R961
结晶8是一种从两面针中提取得到的具有双并四氢呋喃环结构的木脂类化合物。我们采
用小鼠热板法和扭体法两种经典的疼痛模型对结晶8的镇痛作用进行研究,并通过高效液相
荧光检测法观察连续给药7天后小鼠脑组织内和血清中的单胺类递质:去甲肾上腺素
(norepinephrine,NE) 、5一羟色胺(5一hydroxytryptamine ,5一HT) 、多巴胺(dopamine,DA)
的含量变化,并对其镇痛机制进行初步的探究。为临床寻找高效的、无成瘾性的镇痛药开拓
新的途径和提供实验依据。
1. 实验材料
1.1 仪器
热板测痛仪 (自制);Waster1525高效液相仪、Waster2475单波长荧光检测器 (美国waters
公司);C18反相柱(大连依利特分析仪器有限公司)。
1.2 药品与试剂
结晶8(由广西医科大学药学院提供);罗通定片(广东南国药业有限公司,批号:060102 );
醋酸( 国药集团化学试剂有限公司,批号);去甲肾上腺素(AT,瑞士Fluka公
司,批号:2002298) 、5-羟色胺(AT,美国Sigma-Aldrich公司,批号:08107K0)、多巴胺 (AT ,
瑞士Fluka公司,批号:2005278) 。
1.3 动物
昆明种小鼠,体重 18~22g 广西医科大学实验动物中心(桂动许字2001第 001 号)提
供,合格证号:桂医动字第 23003 号。
2. 实验方法
2.1 热板法[1]
将雌性小鼠置于恒温至(55±0.5)℃的热板测痛仪上,记录其出现舔后足所需时间即疼痛
反应潜伏期作为该鼠的痛阈值。实验前筛选动物,将反应潜伏期小于 5 s 或大于 30 s 的动物
1本课题得到高等学校博士学科专项科研基金资助项目(项目编号:20050598003 )的资助。
-1-
剔除。取筛选合格的健康雌性小鼠 40 只,随机分为 4 组:罗通定阳性对照组(20mg/kg );
结晶 8 低剂量组(30mg/kg );结晶 8 高剂量组(60mg/kg );阴性对照组 (生理盐水)。每
组 10 只,编号、称量体重并记录。再重测痛阈 1 次,将两次痛阈的平均值作为该小鼠给药
前的痛阈值(T0 )。各小鼠根据体重按0.2ml/20g 背部皮下注射给药,分别测给药30min、60min、
90min 后各小鼠的潜伏期(给药后潜伏期超过 60s 者按 60s 记录)记录痛阈值。
2.2 扭体法[1]
取健康小鼠40只,雌雄各半,随机分为4组(方法同热板法) 。各小鼠按0.2 ml/20g 的剂量
背部皮下给药,给药30min后,各小鼠根据体重按0.4ml/20g腹腔注射1%醋酸,观察并记录注
射醋酸后15min内小鼠开始出现扭体反应的时间(超过5min则以5min记)和出现扭体反应(以
腹部收缩内凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行为标准)的次数。
2.3 高效液相荧光法测定小鼠血清及脑组
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