梅毒螺旋体和乙肝表面抗原检测中阳性拖带现象与钩状效应的关系.pdfVIP

· 526 。 Jo“rttalofClinic。1口ndExperlment口zMedici Vo1 ． 9． ．7 Apr．2010 梅毒螺旋体和乙肝表面抗原检测中阳性拖带现象 与钩状效应的关系 龚建光 詹慧芳 曹晓东 (1浙江大学医学院附属第一医院输血科 浙江 杭州 310003： 2浙江大学校医院紫金港分院 浙江 杭州 310058) 【摘要】 目地 探讨采用一步法检测梅毒螺旋体和乙肝表面抗原并发生阳性拖带现象时是否存在钩状效应。方 法 将出现阳性拖带现象的第一个阳性孔标本及反应板上其对应位置的前一个标本各34例分成 I、Ⅱ两组，分别用一 步法和二步法进行复检，并将一步法阴性而二步法阳性的标本进行倍 比稀释后用一步法检测，直至检 出阳性。结果 复检后，I组34例标本有5例为阴性，Ⅱ组中有4例 因钩状效应呈假阴性，并且这4例标本造成阳性拖带现象。结论 采用酶联免疫反应(ELISA)一步法检测时可因钩状效应使强阳性标本漏检 ，如果用固定加样针加样还可能造成交叉污 染使其后的标本 出现阳性拖带。 【关键词】 梅毒螺旋体 乙肝表面抗原 全自动加样系统 阳性拖带 一步法 钩状效应 采用全 自动加样系统加样时，由于使用固定加样 阴性 ，Ⅱ组 34例阴性标本有4例为阳性。见表 1。 针，当标本中被检测的抗原或抗体浓度很高，往往会使 表 1 I、Ⅱ两组各 34例标本用一步法和二步法复检结果 (例) 其后的多个样本出现不同程度的污染，引起假阳性结 果，这就是通常说的拖带现象。关于这方面的报道已经 不少 ¨J。但人们往往把反应板上第一个阳性孔的标本 作为污染源。其实，在采用酶联免疫反应 (ELISA)一步 法检测时，由于钩状效应的存在，有时在第一个阳性的 标本前面的那个孔，虽然不显色，却是真正的阳性标本。 2．2 进一步检测结果 将一步法阴性而二步法阳性的 下面笔者就此问题做一探讨。 4例标本进行倍比稀释后用一步法检测，检测结果见表 1 材料与方法 2。可见经稀释后 4例标本分别在稀释度 1：4、1：2、1 1．1 标本来源 均来 自本院2008年6月至 2009年 3 ：2、1：2时检出阳性。并且与这4例标本对应的I组 月术前、输血前传染病检查时，出现阳性拖带现象的第 中的标本复检后均阴性 。 一 个阳性孔及反应板上其对应的前一个样本各34例， 表2 一步法阴性而二步法阳性的标本稀释后一步法S／CO值结果 并且所有样本均经患者同意重新采集后留取，分别编为 I组和 Ⅱ组。其 中每组梅毒螺旋体 (rrP)各 21例，乙肝 病毒表面抗原 (HBsAg)各 13例。 1．2 仪器与试剂 采用帝肯GenesisRSP150加样系统 和德国Behring第三代全 自动酶标分析系统进行试验， TP和HBsAg分别采用上海科华生物工程股份有限公司 生产的梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒 (批及 英科新创科技有限公司生产的乙型肝炎病毒表面抗原 诊断试剂盒(批检测。 1．3 试验方法 将 I、Ⅱ两组分别用一步法和二步法 3 讨论 进行复检，并将一步法阴性而二步法阳性的标本进行倍 在采用双抗体(抗原)夹心法的一步法检测血清中 比稀释后用一步法检测，直至检出阳性。实验均严格按 的抗原(抗体)时，由于抗原(抗体)浓度过高，分别与固 照说明书操作。 相包被物及酶标记物结合，难以形成有效的夹心复合 2 结果 物，使强阳性标本变弱阳性，甚至呈阴性，这种现象被称 2．1 一步法和二步法复检结果 分别经一步法和二步 为钩状效应。但因一步法操作简便快速，仍被广泛应 法进行复检后，I组标本一步法和二步发检测结果相