VEGF重组质粒pcDNAV构建及其在大鼠急性心肌缺血模型中表达.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 !! ! %’ (!! ) (! 年 月 !# $ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 *+,-. !# !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! !#$ 重组质粒%’()* ! 的构建及其在大鼠急性心肌缺血模型中的表达 +,-./01/2,- ,3 !#$ 45,672-8-/ 9:8.62; %’()* ! 8-; 2/. %05..2,- 2- =,;5: 48/. 2/? )1/5 =@,80;28: A.?5628 王雅梅 刘 冰 孙丽翠 闫豫东 司 杨 祁雅慧 ， ， ， ， T9)U V+M*01 WXY G1DC IY) W1MJA1 V9) VAM;DC IX V+DC +D3 Z1 V+M[A1 首都医科大学实验中心，北京 N8L ， ， ， 345%*#6%$/ !%$/%* !+5 #/+, 7$#8%*#/2 (- 9%:#0+, ;0#%$0% .%# #$1 N8L !#$+ 摘 要 构建人血管内皮细胞生长因子（ ）真核表达载体，并研究其在细胞水平和大鼠急性心肌梗死动物模型中的表 %PUFN#8 达。利用/=M\J/ 方法，从人扁桃体组织中扩增人%PUFN#8 基因，构建真核表达载体:-;)9]%。应用脂质体介导的基因转移技 术，将 转染至人胚肾细胞（ 细胞）中，经 筛选获得稳定表达的重组质粒细胞克隆。 、 检测证 :-;)9]% !K$ ULN7 PWXI9 T050,D 6’5 实重组质粒 能在 细胞中高效表达外源 基因，鸡胚绒毛尿囊膜血管生成实验证实表达产物具有促血管生成 :-;)9]% !K$ %PUF 的活性。进一步的体内表达研究，建立大鼠急性心肌梗死模型，将重组质粒 、空质粒 （ ）分三点注射于梗 :-;)9]% :-;)9$ ^ N _ 死交界处心肌内，四周后取材。经免疫组化染色检测， 组在梗死交界区有 阳性表达；电镜观察显示， :-;)9]% %PUF :-;)9]% 组在梗死交界处心肌细胞间有大量毛细血管内皮细胞增生。实验结果表明：成功克隆了人%PUFN#8 基因，构建了其真核表达载 体。体内、外表达研究证实重组质粒的表达产物具有促血管生成的生物学活性，为%PUF 基因治疗缺血性心肌病的研究提供 实验基础。 关键词 血管内皮细胞生长因子，真核表达载体，基因表达，心肌梗死 中图分