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58 蚕 业 科 学 CA NY E KEXUE 2009; 35 ( 1)
具有还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶功能的
家蚕 l( 3) n eo18基因的克隆与表达特征
1 1 1 1, 2 1
王更先 鲁延军 司马杨虎 张升祥 徐世清
( 1
现代丝绸国家工程实验室 ,苏州大学基础医学与生物科学学院 ,江苏苏州 2 15123;
2 山东农业大学林学院 , 山东泰安 27 10 18)
摘 要 果蝇 l ( 3) neo18基因可以通过 P转座子诱发致死突变 ,编码的蛋白质具有还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸
( ) ( ) ( ) ( )
NADH 脱氢酶 ND 的功能 。利用生物信息学 、cDNA 末端快速扩增 RACE 和反转录聚合酶链式反应 R TPCR
( ) ( ) ( )
等方法 ,克隆了家蚕 l 3 neo18 同源基因 ,分析了基因结构与表达谱 。Bm l 3 neo18 基因 EU 826676 的 cDNA 全
( ) ( )
长为 868 bp , 由 573 bp 的完整开放读码框 ORF 序列 、25 bp 的 5 端′非翻译区序列 5 ′U TR 和 251 bp 的 3 端′非编
( ) ( )
码区序列 3 ′U TR 组成 ,编码蛋白质为 190个氨基酸残基 ,分子质量 227 kD , p I 960。Bm l 3 neo18基因由 3个
外显子和 2个内含子组成 ,定位于家蚕第 3染色体 ,位于 n scaf2930 的 1 2038 - 1 2056 knt。Bm l ( 3) neo18蛋白质
在 1 - 185氨基酸残基位置为 ND 的 SGDH 亚基保守区 ,在 6 1 - 83氨基酸残基位置具有一个保守的跨膜区域 。采
用 Clu stal W 进行多序列比对发现 , Bm l ( 3) neo18与埃及伊蚊等昆虫 ND 具有 50% 以上的蛋白质同源性 , N
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