抗氯霉素单克隆抗体的制备及一步式化学发光酶免疫分析方法的建立.pdf

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2017-08-31 发布于安徽
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抗氯霉素单克隆抗体的制备及一步式化学发光酶免疫分析方法的建立.pdf

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为IgGl、1c链，细胞培养上清效价为l：512。采用体内诱生腹水的方法制备单克隆抗体，纯化后对抗体进行了效价、亲和性和特异性测定。结果显示， L一酪氨酸、青霉素、四环素、庆大霉素等结构类似物及常见抗生素的交叉反应率小。利用制备的抗CAP单克隆抗体5D7建立了一步式检测氯霉素的化学发光酶免疫分析法，并进一步优化抗原包被条件、抗体工作浓度、竞争反应相比，在不影响检出限和灵敏度的前提下，减少了操作步骤，缩短了实验时间，更符合快速检测的要求。本研究应用细胞融合技术成功获得了一株分泌抗氯霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞，并对其进行亲和性、灵敏性和特异性测定，同时利用该抗体建立了检测氯霉素残留的一步式化学发光酶免疫分析法。该方法可基本满足我国水产品中氯霉素残留检测限的要求，为氯霉素化学发光试剂盒的研发奠定了基础。关键词：氯霉素残留检测单克隆抗体化学发光酶免疫分析 Ⅱ ANAINST PREPAR ANTIBODIES ATl0NOFMONOCLONAL CHLORAⅣ口HENICOLANDONE．STEP FOR ENZYM[EIM时Ⅱ腻OASSAY CHEMILI瓜I心mSCE】NCE CHLORAⅣ口HENICOL ABSTRACT Asalle虢ctive broad-spectmm枷ibiotic， side of砥toxic觚d once usedin撕mal e仃ects， widely husban蚵Yet，because it iIlmeuseof animals cou厕es．111 h嬲beenbaIled bymany food—producing illtllefood to andreducet11e mcidenceofCAPresidues o订ermonitor potential t0 is a11d methoddetectCAP e髓ctive，sensitiVe of面ma】哆 chain，a specific iIIununoassaMcontailling importance．Chemil啪inescence thechemiluminescence and iIImmne hi曲specifici够in meas嘶ngtechlique