b3统在转基因植物外源基因删除中应用.pdfVIP

罗克明等：一个新的重组酶系统在转基因植物外源基因删除中的应用 一个新的重组酶系统在转基因植物外源基因删除中的应用! ! !!!! !!!!! !!! ! 罗克明 赵德刚 ! # 裴 炎 ! （西南大学生物技术中心 重庆$%%’(） !! （ 贵州大学农业生物技术重点实验室 贵阳))%%*)） !!! （ 康涅狄格州立大学植物学系， ， ） +, %(*(- ./0 摘 要 为了解决转基因植物可能带来的生物安全性问题，设计了一个新的位点特异性 重组酶系统1!23245，该系统中重组酶2!6 基因由热激蛋白371’8 9* 基因的启动子控制， 所有外源基因（包括重组酶基因 、 报告基因和 筛选标记基因）都置于两个融 2!6 4./ 56,:: 合识别位点 之间。将上述重组酶系统通过根癌农杆菌（ ） !#$% ’()*+,-.)/01 -01.2 +,/.34 介导转化烟草，获得的再生植株分别通过4./ 组织染色和6+; 分析等方法进行鉴定。然 后在 = 下热激处理转基因植株，利用4./ 组织染色检测重组酶系统在转基因植株,’ 代幼苗中删除外源基因的效率，结果显示，该系统删除效率达到了$8 * ? @ 8$ - ? ，说明 通过重组酶系统1!23245 能够有效地删除转基因植物中的外源基因，这为解决转基因植 物潜在的安全性问题提供了一条新的途径。 关键词 热激蛋白371’8 9*，位点特异性重组酶系统，基因删除，转基因植物 ［］ ［］ ［］ * $ 法 、共转化技术 和重组酶系统 等等。这些技 % 引 言 术中，重组酶系统是应用较广泛、删除效率相对较高 的一类技术。但该技术也存在明显不足：由于获得 尽管转基因植物已经给人类带来了巨大的利 完整的重组酶系统往往需要通过杂交或二次转化等 ［］ 益，但目前仍有很多人对转基因技术的安全性心存 方式) ，故删除标记基因的过程漫长。 担忧，他们担心转基因植物可能对生态环境构成威 为解决上述问题，一些科学家试图通过瞬间表 ［］ ［］ 胁，转基因食品也可能对人类健康造成危害。因此， ( 达 或化学诱导 等方式来调控重组酶基因的表 为了消除人们的这种担忧，如何将转基因植物中已 达，以缩短删除标记基因的时间，但这些方法的可操 经完成了预期功能的外源基因在特