基于新型硼酸固相萃取柱多巴胺色谱分析方法.pdfVIP

第4 1 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE )摇 研究报告 第3 期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2013 年3 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 406 ~4 11 DOI:10.3724/ SP.J.1096.2013.20813 基于新型硼酸固相萃取柱的多巴胺色谱分析方法 段语晖摇 卫引茂* (西北大学合成与天然功能分子化学教育部重点实验室,化学与材料科学学院,西安710069 ) 摘摇 要摇 用“点击化学冶方法,将炔基化3鄄氨基苯硼酸与叠氮化硅胶反应,制备了新型硼酸固相萃取吸附剂。 采用固相萃取(SPE )对样品进行前处理,反相高效液相色谱分离,紫外检测,建立了一种快速、高效、灵敏的多 巴胺分析方法。 固相萃取的最优条件为: 对200 mg 吸附剂装填的萃取柱,用甲醇活化,磷酸盐缓冲溶液 (pH 8.0 )平衡,再分别用1 mL 水和2 mL 20% 甲醇淋洗,3 mL 1 mol/L 醋酸甲醇溶液洗脱。 采用C18 反相色谱 柱,50 mmol/L 磷酸二氢钠鄄乙腈鄄甲醇流动相(7 颐2 颐1, V/ V)和检测波长280 nm 的色谱条件,对洗脱液进行色 谱分析。 结果表明,该吸附剂对顺式邻羟基化合物有良好的识别能力。 在最优萃取条件下,多巴胺的回收率 达90% 以上。 多巴胺分析的线性范围为0 .1 ~ 100 mg/L ,检出限为0 .0001 mg/L ,相对标准偏差(RSD ) 10 .6% 。 在实际样品分析中,大鼠空白血加标液的回收率均高于97% ,相对标准偏差为4 .30% 。 关键词摇 固相萃取; 高效液相色谱; 多巴胺; 3鄄氨基苯硼酸 1摇 引摇 言 多巴胺(DA )是一种重要的神经递质,在儿茶酚胺类递质的生物合成过程中,多巴胺是去甲肾上腺 [1] 素的前体,是生物体内具有较强生理学效应的内源性活性物质 。 当人体内多巴胺浓度异常时,可能会 导致一些疾病,如精神分裂症、帕金森氏症、忧郁症等。 因此,多巴胺的高灵敏度检测,不仅在生物医药 [2] 化学和神经化学领域有着重要作用,而且可为诊断和病理研究提供依据 。 [3] [4] [5] 对于多巴胺的分析,已发展了液鄄液萃取法 、C18 柱反相萃取 、酸性氧化铝萃取 及离子交换剂萃 [6] [4] [7] [8] 取 等样品前处理,并结合液相色谱分离(HPLC )电化学检测法 ,化学发光法 ,荧光光度法 ,质谱检 [9] 测法 等分析方法。 这些方法存在效率低或选择性差的问题。 基于硼酸与顺式邻二羟基化合物特异性 [10,11] 结合的特点,近年来发展了一种硼酸固相萃取柱结合分析仪器对多巴胺的分析方法 ,其选择性明显