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- 2017-08-31 发布于河南
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HPLC 法测定牛奶中羟脯氨酸
样品:
取某品牌牛奶 0.5g,按照博纳艾杰尔氨基酸分析方法包进行水解衍生,并取混合氨基
酸标准溶液(准确量取氨基酸标准溶液 1.0 mL,置于5mL 容量瓶中,加0.1mol/L 盐酸溶
液定容至刻度)加内标正亮氨酸进行衍生。(异硫氰酸苯酯为衍生剂)
色谱条件:
色谱柱:Agela Venusil AA ,4.6×250mm ,5µm,100Å (订货号:VA952505-K )
流动相:A :称取15.2g 无水醋酸钠,加水1850mL,溶解后用冰醋酸调pH 至6.5,然
后加乙腈140mL,混匀,用0.45µm 滤膜过滤。
B:80% (V/V )乙腈溶液
时间 流动相A
0 0
2 0
15 10
25 30
33 45
33.1 100
39 100
39.1 0
45 0
流速:1.0mL/min
进样体积:10μL
温度:40 ℃
波长:254nm
632.00
[mAU]
0 羟脯氨酸
5
.
6
500.00
368.00
236.00
7
5
3. 12 37
104.00 4. 039. 10. 1146. 1185. 1186.
-28.00
0.00 1.70 3.40 5.10 6.80 8.50 10.20 11.90 13.60 15.30 17.00
[min]
Agela Venusil AA HPLC 法测定牛奶中羟脯氨酸混和标准品图谱
90.00
[mA
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