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低分子量壳聚糖及其衍生物的制备与溶茵酶对其降解的实验
研究
王 征,刘万顺,韩宝芹,魏长征
(中国海洋大学海洋生命学院,山东青岛266003)
摘要:将大分子质量壳聚糖用壳聚糖酶法降解成分子质量为3ku左右的低分子质量壳聚糖,
再将其分别化学修饰成低分子质量的燕甲基壳聚糖和鞋甲基甲壳素,并进行结构表征。在
最适奈件下,用溶茵酶分别对3种多糖进行降解实验,并进行酶解前后多糖的还原糖浓度洲
定和HPLC分析,确定溶茵酶对不同结构多糖的水解能力。结果表明,溶茼酶时羧甲基甲壳
素水解作用最快,_;睦甲基壳聚耱次之.壳聚糖最慢。谊研究为甲壳素衍生物在生物医用材料
中的应用和降解速率调控提供了依据。
关键词:壳聚糖;援甲基壳聚糖;羧甲基甲壳素;溶菌酶;降解
05
3096(2007)100036
中圈分类号:Q539 文献标识码:A 文章编号:1000
甲壳紊(Chitin)是自然界存储量仅次于纤维素物产品作为生物材料,溶菌酶对其水解速度快慢的比
的第二大天然多糖化合物,广泛存在于甲壳动物外 较尚未见报道,本实验用酶法将高分子质量的壳聚糖
壳、某些植物及真菌类细胞壁中.其化学结构为
0一(1—4)一2一N一乙酰氮基一2一脱氧n葡聚糖。甲壳索为3ku左右的低分子质量的壳聚糖。通过化学修饰
不溶于水、一般的酸碱和有机溶剂,在浓碱加热条件 制备出相腑的羧甲基壳聚糖(CMChitosan)和羧甲基
下可脱乙酰基成为壳聚糖(Chitosan)。壳聚糖糖单甲壳索(CMChitin),以此为底物,分别进行溶菌酶水
元C:位带有伯胺基,在酸性溶液中溶解形成聚阳离 解作用的实验研究.为壳聚糖及其羧甲基化衍生物作
子的功能性多糖。由于壳聚糖可溶于水,夫犬拓宽了 为生物医用材料生物降解速度调控方面提供理论依
应用范围,研究和开发应用巳涉及工业、农业、医药, 据。
功能性食品、生物材料、环保和日用化工等众多领
1材料与方法
域“],越来越显示出甲壳素衍生物的重要发展前景。
近10年来,人们日益认识到甲壳素和壳聚糖作为功 1.1材料
能性多糖,具有优良的生物相容性,生物可降解性、无
壳聚糖:本实验室制备,牯均分子质量为39ku,
免疫原性,在机体上具有抑菌、止血、镇痛和促进伤面
脱乙酰度为90.15%;壳聚糖酶:本实验室发酵纯化
愈合等功能,降解产物N一乙酰氨基葡萄糖和氨基葡
G
制品,酶活力为18U/rag;Sephadex25凝胶(Phar
萄糖是构建机体组织的重要性成分。甲壳素/壳聚糖
matin)。
及其衍生物作为生物医用材料的应用已受到生物医
试剂:溶菌酶(JL京鼎国生物技术发展中心,酶活
用工程研究人员的极大关注,并得到广泛的研究应
000
力为10 U/rag),冰醋酸、无水乙醇、KOH、氯乙
用和开发,如作为药物的缓控释可降解材料,应用于
酸、甲醇、三氯醋酸、异丙醇均为国产商品试剂,分析
术后防组织间粘连的胶体和膜材料的制备”],手术
纯。
组织空腔填充可降解材料骨关节滑液体的制造“,
组织工程支架材料厦可降解人工骨的合成n],眼科
疾病治疗修复支架“],神经组织修复导管”1
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