第三节分枝杆菌属（Mycobacterium）.pptVIP

操作及报告结果标准化 《中国结核病防治规划实施工作指南》（2008新版） 《痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》 结核病诊断细菌学检验规程（1995年） 请注意：废弃标本和污染物的处理 痰盒和废弃标本等污染物，均需经高压蒸汽灭菌后才能丢弃或清洗，严禁不经灭菌随意处理。 痰盒等污染物如采用焚烧处理，须置于焚烧炉内彻底焚化。焚烧不彻底或暴露焚烧是有害的。 痰检工作面的消毒：可将痰标本置于一搪瓷盘中，在操作橱内进行痰涂片操作。操作完毕后将盘与废弃物等一并进行高压蒸汽灭菌，或与操作台面同时以3％石炭酸或其他可靠消毒液擦拭后，再以紫外线灭菌灯（距离≤1米）照射30min。 结核分枝杆菌－－结核菌素试验 原理：用结核菌素进行皮肤试验，以检测受试者对结核杆菌是否有细胞免疫及迟发型超敏反应的试验。 结果：注射部位是否出现红肿硬结判断结果 ＜5mm为阴性 ≥5mm为阳性 ＞ 15mm为强阳性 应用：选择卡介苗接种对象；判断卡介苗接种效果；辅助诊断婴幼儿结核病；测定肿瘤患者细胞免疫状态 思 考 题 痰标本为何要做集菌前处理? 怎样集菌? 痰检抗酸杆菌的意义？ 痰检需注意的生物安全问题？查资料了解一下 查资料了解国内外结核疫情? 标本 集菌涂片 染色镜检 前处理 基因检查 荧光 染色 抗酸 染色 报告 分枝 杆菌 报告 抗酸 杆菌 动物 试验 分离 培养 L型 培养 观察生长情况 抗酸 染色 生化 反应 药敏 试验 报告（种别） PCR DNA探针杂交 报告 报告 鉴定 直接涂片 √ √ √ * 缺乏快速早期准确的诊断方法 * 合并HIV感染者诊断 * 无症状感染者与患者的鉴别 * 耐药性的快速鉴定 实验室诊断存在的主要问题 四、 流 行 病 学 与 防 治 原 则 （一）流 行 病 学 传染源：患者（开放性肺结核患者） 传染途径：呼吸道、消化道、皮肤黏膜破损处 临床类型：儿童（原发感染）；成人（原发后感染） 疾病特点：人群普遍易感； 以结核结节和干酪样坏死为主要病理特征； 细胞免疫为主，同时获得对结菌的迟发型超敏反应 （二）防治原则 早诊断、早治疗（及时、敏感、足量、联用、全程） BCG、DNA疫苗 * * 第三节 分 枝 杆 菌 属 (Mycobacterium) 分枝杆菌属的分类 结核分枝杆菌复合群 (生长慢不产色) 结核分枝杆菌 牛分枝杆菌 非洲分枝杆菌 田鼠分枝杆菌 非结核分枝杆菌 Ⅰ群(光产色菌) Ⅱ群(暗产色菌) III群(不产色菌) Ⅳ群(快速生长菌) 麻风分枝杆菌(人工培养基不生长) √ √ 结 核 分 枝 杆 菌 (Mycobacterium tuberculosis) 1882年3月24日德国细菌学家郭霍发现 一、分 类 结核分枝杆菌复合群 (生长慢不产色) 结核分枝杆菌(90%) 牛分枝杆菌 (5%) 非洲分枝杆菌(5%) 田鼠分枝杆菌 二、生 物 学 特 性 结核杆菌抗酸染色(×1000) 结核杆菌的扫描电镜照片 结核杆菌菌落 “谗、懒、顽、变” “谗、懒”：胞壁含脂质高，营养要求高， 生长缓慢； 罗-琴(L-J培养基) （含蛋黄、甘油、马铃薯、 无机盐、孔雀绿等） 培养需2-4周有菌落生成 “顽” ：对某些理化因素抵抗力较强 抗干燥：在干燥痰中可生存6-8个月， 附在尘埃上传染性可保持8-10d; 抗酸碱：抗6%H2SO4或4%NaOH达30min(集菌) 抗染料：1:13000孔雀绿或1:75000结晶紫 “变”：形态、菌落、毒力及耐药性均可变异 卡介苗:毒力变异株 （Bacille Calmette-Guerin，BCG） 耐药变异株:药物选择作用 (应规范用药,药敏试验选敏感药物联合用药) R-S变异:菌落变异 L型变异:药物等诱导而成,TSA-L培养基生长 　肺结核患者外周血中的分枝杆菌伴非抗酸颗粒， 培养法　抗酸染色　×1000 杀灭结菌的方法： 1、阳光下暴晒2h； 2、5%-12%来苏作用5min-2h； 3、75%酒精接触2min； 4、煮沸1min； 5、焚烧—是最简便的灭菌方法 生化反应 热触酶试验 结核分枝杆菌、牛分枝杆菌 (-) 非结核分枝杆菌