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水质对生物黏泥胞外聚合物成分的影响 刘芳1，侯衍美2，赵朝成1，王永强1，夏璐1 (1．中国石油大学化学化工学院，山东青岛266555；2．海工英派尔工程有限公司，山东青岛266061) 摘要：针对循环冷却水补充水的水质特点，采用单因素实验方法分别考察了营养物质(BOD5，NH4+-N，TP)、颗粒物(CaCO3)、矿物质(Ca2+，Mg2+，Na+，Fe3+)等因素对生物黏泥胞外聚合物成分的影响。研究结果表明：循环冷却水系统生物黏泥胞外聚合物主要由多糖构成；控制营养物质达到C(BOD5)≤5 mg／L，c(NH4+一N)≤6 mg/L，c(TP)≤lmg/L，颗粒物满足c(CaC03)≤40 mg／L，矿物质满足c(Ca2+)≤210 mg／L，c(Mg2+)为85～185 mg/L，c(Na+)≤120mg／L，c(Fe3+)≤1 mg／L，可使生物膜中的胞外聚合物(EPS)含量最少。 关键词：循环冷却水；胞外聚合物；营养物质；颗粒物；矿物质 中图分类号：TQ 085；TB 304 文献标识码：A 炼油废水富含有机物和各种离子，可以提供微生物生长必需的营养成分。细菌在牛命活动中会向细胞外分泌大量的粘性物质，这些粘性物质会与水中的无机盐悬浮物、沙粒、藻类等物质和微生物黏附在一起，从而形成生物黏泥。生物黏泥会引起传热效率降低、管道堵塞、结垢腐蚀加剧等。胞外聚合物(EPS)主要来源于细胞内分泌、细胞自溶和水中吸附。由于EPS是生物黏泥最主要的成分，其组成和数量会影响生物黏泥的强度、吸水性、空隙率、吸附性和微牛物代谢活性等。EPS的组成比较复杂，多糖和蛋白质约占EPS总量的70％～80％，含量较低的腐殖质、核酸、糖醛酸、脂类和氨基酸等也是EPS中常见的物质。在小同基质条件下形成的生物黏泥的化学组成不同，导致EPS的化学组成也存在一些差异。笔者就营养物质(BOD5，NH4+一N，TP)、颗粒物(CaCO3)和矿物质(Ca2+，Mg2+，Na+，Fe3+)对生物黏泥EPS成分的影响进行研究，为进一步研究炼油废水回用于循环冷却水时生物黏泥的控制问题奠定基础。 1 实验 1．1生物黏泥的培养 实验所用装置为江苏省高邮市摩天电子仪器有限公司生产的RCC—II型旋转腐蚀挂片实验仪，采用A3碳钢挂片，在挂片上培养生物黏泥。主要实验条件：水温(35±1)℃，试片旋转速度75 r／min。营养水质用葡萄糖作碳源(葡萄糖与BOD5的质量比为1：0．6)，以硫酸铵((NH4)2SO4)作氮源，以磷酸氢二钠(Na2HP04)作磷源。用自来水配置营养液，补充微量元素(如钙、镁、钠等)，并根据不同的水质要求，投加不同的无机盐。投入菌种后，用曝气机曝气10 h，停止曝气后静置l～2 h，换水排掉悬浮态细菌，再按要求加人营养液，重复上述操作。以12 h为一个培养周期，直到生物膜长到合适的厚度。 菌种来源为胜华炼油厂循环冷却水系统凉水塔下面的集水池。接种水和自来水水质测定方法及测定值如表1所示。 1．2分析测定方法 1．2．1 胞外聚合物的提取 采用甲醛一氢氧化钠法提取生物黏泥的胞外聚合物。具体方法如下：(1)剥落。取3片挂片连同50 mL去离子水一起放入烧杯中，用超声波震荡约10 min；(2)洗脱。将50 mL黏泥样品离心5 min(8000 r／min)后撇去上清液，向黏泥小球中加入缓冲溶液(2 mmol／L Na3P04，4 mmol／L NaH2P04，9mmol／L NaCI和l mmol／L KCI，pH值为10)，使其体积恢复到50 mL；(3)提取。加入0．3 mL甲醛，300r／min下搅拌0．5 h，再加入50 mL 0．04 mol／L的NaOH溶液，继续搅拌1 h，离心10～20 min；(4)过滤。取离心后的上清液用微孔滤膜过滤，取清液待测。 1．2．2胞外聚合物成分的测定 (1)多糖的测定。采用总酮一硫酸法。高温下糖类会被浓H2SO4脱水生成糠醛或糠醛衍生物，并与蒽酮(C14H10O)缩合成蓝色化合物，在620 nm处呈现最大光吸收。 具体方法如下：配制一系列标准糖溶液，分别量取蒽酮试剂4 mL和标准糖液1 mL置于试管中，迅速浸于冰浴中冷却，然后沸水浴上加热10 min(加盖，防止水蒸发、损失)，冷却，620 nm下，用721型分光光度计对空白样品(以1 mL H2O代替糖液)测定吸光度，做出葡萄糖标准曲线。测定样品的A620以葡萄糖的标准曲线可换算出糖的含量。将结果折算成单位表面积挂片上的多糖含量。 (2)蛋白质的测定。蛋白质测定采用Bradford(考马斯亮蓝法)。考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后颜色由红色转变为蓝色，在595 nm处产生最大光吸收。 具体方法如下：结晶牛血清蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯