伴刀豆球蛋白糖蛋白特异性识别作用构筑的多层膜及其在生物.pdfVIP

V o l. 25 高 等 学 校 化 学 学 报 　 N o. 3　 2 0 0 4 年 3 月 　　 　　　　　CH EM ICAL JOU RNAL O F CH IN E SE UN IV ER S IT IE S　　　　　 　　 575～ 579　 伴刀豆球蛋白- 糖蛋白特异性识别作用构筑的 多层膜及其在生物传感器制备中的应用 史立新, 卢迎习, 张　晶, 刘俊秋, 沈家骢 ( 吉林大学超分子结构与材料教育部重点实验室, 长春 130023) 摘要　研究了伴刀豆球蛋白糖蛋白特异性分子识别作用构建的多层膜及其在葡萄糖生物传感器制备中的应 用. 结果表明, 含有糖残基的葡萄糖氧化酶可以通过识别作用组装进入多层膜, 不含糖基的过氧化氢酶经过 化学修饰引入麦芽糖残基, 也可以通过分子识别作用组装到多层膜中. 对于多层膜厚度研究的结果表明, 膜 的厚度随层数的增加呈线性关系. 研究了多层膜的表面形貌, 并讨论了膜结构与功能的关系. 伴刀豆球蛋白 酶多层膜修饰的金电极的电化学实验表明, 多层膜中的酶具有催化活性. 过氧化氢酶葡萄糖氧化酶串联组 装的生物传感器能够有效消除样品中过氧化氢对葡萄糖测定带来的干扰. 关键词　伴刀豆球蛋白; 糖蛋白; 层层状组装; 生物传感器 中图分类号　 63 1　　　　文献标识码　 　　　　文章编号　025 10790 (2004) O A 生物分子的层层状薄膜组装已经成为生物材料科学研究的热点, 它是构建各类生物传感器及生物 [ 1 ] 反应器的基础 . 基于正负电荷相互作用的静电多层膜 自组装为生物功能材料的发展提供了重要手 段[2, 3 ] , 由于静电相互作用的非特异性, 多种物质已经被成功地组装到多层膜体系中, 如人工合成的聚 电解质、蛋白质、 、胶体微粒和无机薄膜等. 然而, 这种多层膜的制备方法通常是依靠带相反电 DN A ( ) 荷物质的相互作用, 为选择成膜物质和实验条件 如pH 值、溶液离子强度 带来不便. 近年来, 利用蛋白质分子特异性识别作用, 成功地进行了多种层层状生物功能膜的组装[4, 5 ] , 但该 方法可利用的生物分子种类少, 缺少与酶复合的抗体. 另一种方法是生物素抗生物素的识别, 酶与附 着在电极表面的生物素分子偶连, 在 2 个生物素分子之间连接 1 个抗生物素分子[ 6, 7 ]. 利用这种方法制 ( 15 ) 备的薄膜具有有序的单分子层结构, 而且结合作用强 结合常数大约为 10 . 因此, 通过在电极 L m o l 表面交替沉积抗生物素蛋白和生物素标记的酶可以获得酶生物传感器. 伴