微生物学实验技术-乳酸菌分离与纯化-2009.pptVIP

实验九 乳酸菌的分离纯化 目的要求： 学习从新鲜酸乳中分离纯化乳酸菌的方法 学习乳酸的检测方法 基本原理： 选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养、酸碱度、温度和氧等要求造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物；加入某种指示剂，使待分离微生物在培养基中形成具有明显特征的菌落。 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体。因此可通过挑取单菌落而获得一种纯培养。获取单个菌落的方法可通过稀释涂布平板或平板划线等技术完成。 实验器材： 菌种 市场销售的各种新鲜酸乳 辉山酸奶 BGC 牛乳培养基 脱脂乳试管培养基 脱脂乳粉 蔗糖 操作步骤： （一）乳酸菌的分离纯化 1.分离 培养基的配制 灭菌 倒平板 制备样品稀释液 接种（涂布法） 培养 BGC 牛乳培养基 （A）溶液：脱脂乳粉 100g，水500mL，加入1.6%溴甲酚绿 B.G.C 乙醇溶液1mL,80℃灭菌20min。 （B）溶液：酵母膏10g，水500mL，琼脂20g，pH6.8, 121℃灭菌20min。 以无菌操作趁热将（A）、（B）溶液混合均匀后倒平板。 取市售新鲜酸乳稀释至10-6，取其中的10-4、10-5 、 10-6 3个稀释度的稀释