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伪狂犬病毒 基因的克隆表达及其对病毒增殖的影响
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肖少波 方六荣 王革非 陈焕春 洪文洲
4
(华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室 武汉 !#$$0$ )
华中农业大学农业部农业微生物重点实验室 武汉 )
( !#$$0$
摘 要:从伪狂犬病毒( )国内地方分离 株基因组 片段中克隆了完整的 基因,
67 89 :.; !
序列分析结果表明, 基因编码区全长 ,可编码 个氨基酸残基,二级结构预测具有
! 44$4= #%%
典型 型膜蛋白特征。与 中收录的国外 株的同源比较发现, 株 在核苷酸
?-,@9,A 7BC- 89 !
和氨基酸水平上均存在多处突变,尤其是潜在胞浆区中连续两个碱基的缺失导致移码突变,
致使 基因的读码框架后移,从而导致 株 较 株长 个氨基酸残基。将 基因克
! 89 ! DBC- 4% !
隆到真核表达载体=C:.;# E 4 F 中的人巨细胞病毒早期启动子下游,构建的真核表达质粒转
染 细胞,间接免疫荧光检测证实 获得正确表达。进一步测定天然缺失 的 弱
6G241 ! ! 67
毒 株在表达 细胞系和空白载体转染的对照细胞系中的蚀斑形成单位( )和组织细
@9DHI9 J =K+
胞培养半数感染量( ),结果显示: 株在表达 细胞系中的 和 分别为对
L3: @9DHI9 J =K+ L3:
1$ 1$
照细胞系的 和 。说明 具有促进病毒增殖的功能。
4%! M $$ M J
关键词:伪狂犬病病毒, ,序列分析,体外表达,增殖
J
中图分类号: ,
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