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伪狂犬病毒gI基因克隆表达及对病毒增殖影响.pdfVIP

伪狂犬病毒gI基因克隆表达及对病毒增殖影响.pdf

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卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’( )! .’ ) # 年 月 $$ % !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,- $$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 伪狂犬病毒 基因的克隆表达及其对病毒增殖的影响 +. , , 4 4 4 4 4 肖少波 方六荣 王革非 陈焕春 洪文洲 4 (华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室 武汉 !#$$0$ ) 华中农业大学农业部农业微生物重点实验室 武汉 ) ( !#$$0$ 摘 要:从伪狂犬病毒( )国内地方分离 株基因组 片段中克隆了完整的 基因, 67 89 :.; ! 序列分析结果表明, 基因编码区全长 ,可编码 个氨基酸残基,二级结构预测具有 ! 44$4= #%% 典型 型膜蛋白特征。与 中收录的国外 株的同源比较发现, 株 在核苷酸 ?-,@9,A 7BC- 89 ! 和氨基酸水平上均存在多处突变,尤其是潜在胞浆区中连续两个碱基的缺失导致移码突变, 致使 基因的读码框架后移,从而导致 株 较 株长 个氨基酸残基。将 基因克 ! 89 ! DBC- 4% ! 隆到真核表达载体=C:.;# E 4 F 中的人巨细胞病毒早期启动子下游,构建的真核表达质粒转 染 细胞,间接免疫荧光检测证实 获得正确表达。进一步测定天然缺失 的 弱 6G241 ! ! 67 毒 株在表达 细胞系和空白载体转染的对照细胞系中的蚀斑形成单位( )和组织细 @9DHI9 J =K+ 胞培养半数感染量( ),结果显示: 株在表达 细胞系中的 和 分别为对 L3: @9DHI9 J =K+ L3: 1$ 1$ 照细胞系的 和 。说明 具有促进病毒增殖的功能。 4%! M $$ M J 关键词:伪狂犬病病毒, ,序列分析,体外表达,增殖 J 中图分类号: ,

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