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8 中国烟草科学 ChineseTobaccoScience 2010-O8,31(4)
烟草钾离子通道基因NKT5的克隆和序列分析
司丛丛 1,2 刘贯山1,刘好宝 ,焦 蓉1,2 王树林 1,2 曲平治3 刘朝科 ,胡晓明 ,冯祥国
(1.农业部烟草类作物质量控制重点开放实验室,中国农业科学院烟草研究所,青岛 266101;2
. 中国农业科学院研究生院,
jE京 100081;3.川渝中烟工业公司,成都 610000)
摘 要:本研究运用已经获得的1条490bp的普通烟草钾离子 (I(+)通道基因的中间片段来设计特异性弓I物,应用RACE
方法获得其 3和5末端 cDNA序列。通过三段cDNA序列拼接结合全长克隆测序验证,获得一个未报道的普通烟草K+通
道基因,并将其命名为NKT5(NCBI登录号为HM010922)。NKT5的eDNA全长为2365bp,其中5,端非编码区190bp、
3端非编码区249bp、编码区1926bp,编码641AA。对该基因进行了序列分析及功能预测,为进一步阐明其在烟草吸钾
及抗逆过程中的功能及分子机制奠定了基础。
关键词:烟草;I(+通道基因;AR CE;克隆;序列分析
中图分类号:TS413 文章编号:1007—5119(2010)04—0008.06 DOI:10.39690.issn.1007.5119.2010.04.002
CloningandSequenceAnalysisofPotassium IonChannelGeneNKT5in
NicotianaTabacum
SICongcong ,LIU Guanshan,LIU Haobao ,JIAO Rong,一,
WANGShulin ,QUPingzhi,LIUChaoke,HUXiaoming,FENGXiangguo。
(1.KeyLaboratoryofTobaccoQu~ityControl,MinistryofAgriculture,TobaccoResearchInstitute,ChineseAcademyof
AgriculturalSciences,Qingdao266101,China;2.GraduateSchool,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100081,
China;3.ChinaTobaccoChuanyuIndusrtialCorporation,Chengdu610000,China)
Abstract:Basedona490bpmiddlesegmentofK ionchannelgene,apairofspecificprimerswasdesignde toacqu~e5’nad
3-endsofeDNA byAR CEsrtategy.AnunreportedK ionchnanelgeneintobacco (Nicotianatabacum)namde asNKT5was
obtainedbysplicingthreecDNAsequencesna dsequencingfull—lengthcloning.Thefull-lengthcDNA ofNKT5is2365bplongwiht
190bp5-untranslatedregion(UTR),249bp3’一UTRnad1926bpcodingsequence.Thededucde anlinoacidis641AAlong.The
genesequencenaalysisna dfunctionpredictionwerecardedoutinordertoclarifymolecularmechanismsofpotassium absoprtion
na dstress.resistna ceinhtetobacco.
Keywort|s:tobacco;Kionchannelgene;AR CE;clone;sequence
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