北京化工大学仪器分析第三章 液相色谱实例分析.ppt

液相色谱常见问题及故障排除经验 液相系统维护流程图 等度系统 液相色谱故障排除经验 故障的确定 —至少要重复出现两次以上 初步判断故障引起的原因 —方法或硬件 由经验或平时的积累确定故障原因 —平时做好观察和记录 当不能确认故障原因时 —采用排除法逐一考察可能引起故障的因素 确定故障能否自行处理 —不要贸然拆卸不熟悉的部件 常见故障因素 仪器环境： —实验室的温度、湿度、酸度等 —实验室震动、灰尘等问题 —电源及地线问题 使用条件： —流动相（pH值、均匀度、气泡等） —样品（样品分解、氧化、样品溶剂等） —色谱柱（污染、堵塞、塌陷等） 硬件问题： —输液泵 —进样器 —检测器 平常保养 -做好平常的保养可以有效的降低故障的发生率 -做好平常的保养可以延长仪器的使用寿命 常做的保养 —保证仪器的使用环境（经常清洁仪器，尤其是灰尘） —泵的保养（使用缓冲盐时要清洗柱塞，水和盐不要长期 保存在泵里） —进样器要经常清洗，避免污染物吸附或堵塞管路 —尽量进行样品前处理 —色谱柱要定期清洗，保证柱效及使用寿命 —系统中不要长期保存水和盐，长时间不用时应将仪器所 有部分全部更换为70％以上的甲醇，避免细菌的滋生及 盐的析出。 压 力 压力是液相色谱中最重要的指标，要经常关注 压力的变化。 保留时间的变化经常是由于压力问题引起的。 不同溶剂即使在相同流速和温度的情况下压力 也是不同的。 记下仪器正常状态时，在固定条件下（流动相、流速、温度等）的压力显示值。 压力过高时 首先要确认是色谱柱堵塞还是系统堵塞 色谱柱堵时，确认可能造成堵塞的样品的性质，相应选择合适的清洗溶剂。 系统堵塞，首先应确认是哪一部份堵塞，依据情况由后向前进行排除。 容易发生堵塞的部件 保护柱及色谱柱 线路过滤器 混合器过滤组件 管路连接处 进样器 检测器流通池 压力过低 压力波动 压力在短时间内剧烈波动。 经常漏液的部件 泵：柱塞密封圈,排液阀 手动进样器：转子密封圈磨损 检测器： 流通池窗口（垫片损坏、透镜破碎） 接头处漏液：（接头松动，接头脏，接头磨损， 部件不匹配） 保留时间不稳定 吸滤头脏 泵输液不正常（压力波动、气泡等） 流动相组分变化 流动相缓冲能力不够 色谱柱平衡时间不够 柱温的变化 柱子问题 噪音大 流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 漏液 流动相、泵、检测器流通池内有气泡 流动相各溶剂不相溶或混和不均匀 检测池能量不足 流通池被污染 温度影响（检测器和柱温差别太大） 其他电子设备的影响或电源、地线等 基线漂移 流动相污染，变质或由低品质溶剂配成 流动相不均匀(脱气，使用纯度更高的溶剂) 温度波动 系统平衡时间不够 流通池被污染或有气泡 流通池窗口破裂 峰形问题 死体积太大 柱子被污染或堵塞 色谱柱塌陷 流动相缓冲不足或不合适 样品溶剂选择不当，与流动相之间极性差异太大 样品过载（浓度或体积） 柱温过低 选择原则 采用 “HPLC” 级溶剂 避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂 对试样有适宜的溶解度 溶剂粘度要小 与检测器相匹配 过滤：0.45um或更小孔径滤膜 目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色 谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲 液时。 吸滤头 吸滤头 材料：不锈钢(或陶瓷)烧结，孔径10um 故障：堵塞 表现：管路中不断有气泡生成 措施：用异丙醇（或5％稀硝酸），超声波清洗，再 用蒸馏水清洗 单向阀 进样器 自动进样器 手动进样器(7725/7725i） 原理：（六通阀） 注入方式： 1）全量注入 2）部分注入 色谱柱的日常保养 购买新柱后一定要仔细阅读说明书，确认柱的使用条件以及清洗再生步骤，按照说明书条件测试色谱柱柱效，记录使用压力 定期检测柱压和柱效 不同流动相之间转换时应注意溶剂的互溶性 确认样品不会在流动相中析出或带有固体不溶物，请使用0.45um或0.2um的一次性滤膜过滤样品，或者进行前处理。 为了延长色谱柱使用寿命，请使用保护柱。 定期用合适的溶剂清洗或再生色谱柱 长期不用时，清洗干净后，使用柱子说明书中指明的溶剂保存。柱子要从仪器上卸下并用堵头密封后保存。 定期用合适的流动相清洗保存的柱子，避免干涸。 峰产生有肩或分叉的原因 1. 柱子劣化 （进口处产生不均匀的空隙） 溶剂效应 3. 样品劣化 （生成氧化物、分解物等