Graves病患者外周血CD4^＋CD28ˉT淋巴细胞的检测和分选.pdfVIP

维普资讯 苏州大学学报(医学版)2007；27(6) 949 · 方法与技术 · Graves病患者外周血CD4+cD28-T淋巴细胞的 检测和分选 於葛华 ，孙治平 ，朱华亭 ， 张光波 ，张学光 (1．苏州大学医学院 免疫学教研室 ，江苏苏州 215007；2．苏州大学附属第一医院，江苏苏州 215006) 摘要：目的 分析CD4CD28一T淋巴细胞Graves病(毒性弥漫性甲状腺肿)患者外周血的表达及探索纯化该T细 胞的有效方法。方法 运用常规密度梯度法分离Graves病患者外周血单个核细胞，用CD4、CD28单克隆抗体进行免 疫荧光双标记后进行流式细胞术检测和分选。结果 Grave病患者外周血T细胞亚群中，CD4+CD28一的表达率明显高 于正常人(P0．01)，采用流式细胞术和单克隆抗体双标记对 CD4’CD28一T淋巴细胞进行快速无菌分选是可行的。结论 流式细胞术可用于 Graves病患者外周血 CD4CD28-T淋 巴细胞 的检测和分选。 关键词 ：Graves病 ；CD4+CD28一T淋 巴细胞 ；流式细胞术 中圈分类号 ：R581．103 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673—0399f20o7)06—o949—03 DetectionandSortingofCD4+CD28一T Lymphocytes inPeripheralBloodinPatientswithGravesDisease YUGe—hud．SUNZhi-ping1,ZHUHua-ting~ZHANG Cuang-bo2,ZHANGXue-guangI (1．DeptofImmunology，MedicalSchoolofSuzhouUniversity，JiangsuSuzhou215007，China； 2．TheFirstHospitalAffiliatedtoSuzhouUniversity，JiangsuSuzhou215006，China) Abstract：Objective TodetectCD4+CD28一TcellsinperipheralbloodinpatientswithGraves disease(GD)anddevelopaneffectivemeasureofpurifyingthesesTcells．Methods PBMCs(peripheral bloodmononuclearcells)wereisolatedwithroutinedensitygradientcentrifugationmethod，stainedwith fluorochromeconjugatedantibodies，andanalyzedandsortedbyflowcytometrysubsequently．Results ItshowedthatthelevelofCD4+CD28一T cellsinperipheralbloodT lymphocytesfrom GD patientswas significantlyhigherthanthatrfomhealthysubjects(P0．01)．Anditwasdemonstratedtobeaneffective measureofsortingCD4~CD28一T cellsquickly andasepticallywith twocolorflow cytometrymehtod． Conclusion Flow cytometry issuitablefordetection andsortingofCD4+CD28一T lymphocytesin peripheralbloodofGD patients． Keywords ：Gravesdisease；CD4+CD28一T l