HPLC测定热毒清片中重楼皂苷含量.pdfVIP

维普资讯 第 9卷 第 12期 2007年12月 中国现代 中药 Vof．9No．12 Dec． 2OO7 HPLC测定热毒清片中重楼皂苷含量 韦建荣 ，李劲 (云南 白药集 团股份有限公司，云南 昆明 650118) [摘要]目的：采用高效液相色谱法测定热毒清片中重楼皂苷 I和重楼皂苷 Ⅱ的含量。方法：色谱条件为ODS色谱 柱 ，流动相 乙腈 一水 (48：52)，检测波长203nm。结果：重楼皂苷 I和重楼皂苷 Ⅱ两成分均达基线分离，其他成分无干 扰，重楼皂苷 I进样量在 1．88—23． g线性关系良好，r=0．9994，重楼皂苷 Ⅱ进样量在 1．80—22．51xg线性关系良好， r=1．000)，平均回收率分别为 99．6％，98．6％。结论：该方法简便、准确可靠。 [关键词]热毒清片；重楼皂苷 I；重楼皂苷 1I；HPLC 热毒清片由重楼、板蓝根、蒲公英 、甘草等多 使浓度均为 1mg·mL ，作为对照品溶液。 味中药组成，具有清热解毒、消肿散结等功效，临 2．3供试品溶液制备 床上用于热毒内盛所致的腮腺炎 、扁桃腺炎、喉头 热毒清片除去包衣 ，片芯粉碎后，取粉末约 炎、呼吸道感染 ，为国家基本药物 。热毒清片中 2g，精密称定 ，置具塞锥形瓶 中，加水饱和的正丁 重楼为主要成分 ，现代研究表 明，重楼 中多种 甾体 醇约 50mL，密塞，超声处理 (功率250W，频率 皂苷为其主要活性成分 ，重楼皂苷 I及重楼皂苷Ⅱ具 25KHz)1h，滤过 ，用适量水饱和的正丁醇洗涤残 有细胞毒活性及免疫调节活性 ， 《中国药典》2005 渣3次，合并滤液及洗涤液 ，水浴蒸干 ，残渣用 甲 年版已将重楼皂苷 I和重楼皂苷 Ⅱ作为重楼含量测定 醇溶解并定量转移至 10mL量瓶 中，加 甲醇稀释至 的指标成分 。目前热毒清片质量标准中还没有含 刻度 ，摇匀，作为供试品溶液。 量测定项，在文献 的基础上 ，我们开展热毒清片 2．4阴性样品溶液的制备 中重楼皂苷 I及重楼皂苷 Ⅱ的HPLC含量测定研究 ， 按处方制备除重楼外的热毒清阴性样品，阴性 以期为控制热毒清片质量提供可行的含量测定方法。 样品溶液的制备操作同供试品溶液 。 1 仪器与试药 2．5系统适应性试验 1．1仪器 按上述色谱条件分别进样 101xL对照品溶液、供 HP1100高效液相色谱仪，包括 1100系列单元泵、 试品溶液和阴性样品溶液进行分析，色谱图见图 1～ 自动进样器、柱温箱、可变波长检测器。CQX25—06 3，得重楼皂苷 I及重楼皂苷Ⅱ的理论塔板数分别为6 型超声波发生器 (功率250W，频率25KHz)。 755，6647，阴性样品溶液 中在无重楼皂苷 I及重楼 1．2试药 皂苷Ⅱ峰位置无其他峰出现，两种皂苷成分与其相邻 重楼皂苷 I及重楼皂苷 Ⅱ对照品购于昆明植物 峰均达基线分离 ，其他共存组分对测定成分无干扰。 研究所 ，采用 HPLC面归一化法测定纯度达 99％以 上 ；热毒清片为云南 白药集团股份有 限公司生产 ， 批号见表 3；乙腈为色谱纯 ，其余试剂均为分析纯。 II 1 2 方法与结果 2．1色谱条件 色谱柱：ODSHypersil(4．0ramX250ram，5txm)， 0 l0 20 0 l0 20 0 l0 20 流动相 ：乙腈 一水 (48：52)，流速：1．0