HPLC法测定中药中盐酸小檗碱时应注意的问题.pdfVIP

维普资讯 48 中国药品标准 2oo7年第8卷第6期 (总448 HPLC法测定中药中盐酸小檗碱时应注意的问题 冯有龙，曹 玲，王 玉(江苏省药品检验所，南京210008) 中图分类号：921．2 文献标识码：B 文章编号：1009—3656(2007)一6—48—2 PrecausionsintheDeterminationofBerberineChloridebyHPLC FengYou—long，CaoLing，WangYu(JiangsuInstituteforDrugControl，Nanjing210oo8) 盐酸小檗碱属于异喹啉类原小檗碱型生物碱，化 8．8％相当，所以盐酸小檗碱对照品使用说明书中描 学名为5，6．二氢．9，1O-二甲氧苯并[g]．1，3．苯并二氧 述为：“105℃干燥 5h后，按含2个结晶水计算 (C加 戊环[5，6一)喹嗪盐酸盐二水合物，成品为黄色结晶 H C1NO ·2H：0)。”这就要求在含量限度的描述中 性粉末；无臭，味极苦。盐酸小檗碱在 自然界分布很 规定是以含水物计还是以无水物计，若以无水物计则 广，如毛茛科的黄连属和唐松草属、防己科的古山龙 应注意在计算中乘 以换算系数 (0．912)，且在制订含 属、芸香科的黄柏属、小檗科的小檗属和十大功劳属 量限度时要考虑到这一点。然而有许多新药注册 申 中均有存在。含盐酸小檗碱的代表性药材有黄连、黄 请的研究资料中均忽视了这一点，误认为经 105c=【干 柏、三颗针、功劳木等，它们均有较强的清热燥湿、泻 燥5h后对照品中的结晶水失去，对照品用的是含水 火解毒功效；同样地，含有上述中药材的中药复方制 物、称量数据也是含水物，含量限度 以无水物计却未 剂(中成药)中也含有盐酸小檗碱。盐酸小檗碱具有 做相应折算，这样就造成了含量测定 “结果”的较大偏 明显的抗病原微生物和抗炎作用，另外还有抗高血 差。有时还会出现同批样品企业 自检报告符合规定 压、扩张血管、增强耐缺氧能力、局部麻醉、止痛、降血 而药检所的复核报告不符合规定的现象，这也是因为 糖、抗腹泻、利胆、退热、镇静等广泛的药理作用uj。 未折算结晶水的缘故。 鉴于盐酸小檗碱具有明显而公认的药理活性，所以常 2 高效液相色谱法色谱条件的优化 用来作为药理活性成分或指标性成分在中药材或中 现在文献报道的盐酸小檗碱的含量测定方法基 成药中加以控制。文献报道的盐酸小檗碱的含量测 本上全采用高效液相色谱法，且多为反相色谱法，色 定方法有分光光度法_2』、薄层扫描法 、极谱法 引、 谱柱大多选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(C 离子选择电极法 J、苦味酸 比色法 J、离子对萃取 柱)，鲜有用正相色谱法的；同为 C 柱，不同厂牌的 法 j、非水毛细管电泳法_9J、高效液相色谱法¨等， 色谱柱其分离效果亦不尽相 同，研究表 明以Dia． 其中以高效液相色谱法应用最多也最普遍。现就盐 mondC18柱 、PhenomenexlunaCl8柱、KromasilC18柱 酸小檗碱含量测定中应注意的问题分述如下： 等品牌效果较好 。反相色谱法的流动相组成中有机 1 含量限度中应明确是以含水物计还是以无水物 相多选用乙腈，有时配以四氢呋喃；水相有2类，一 计 类是离子对试剂、十二烷基硫酸钠(0．17％)配以磷 通常情况下，无论是从植物 中提取得到还是人工 酸二氢钾 (0．34％)，另一类是磷酸盐缓冲液，2O 合成品，盐酸小檗碱均以二水合物(含2个结晶水)的 mmo]·L 的磷酸二氢钾或磷酸二氢钠溶液，以磷 形式存在，其分子式为c∞H。C1NO ·2H：0，中检所 酸调节pH值至一定数值 (大多数为3．0—3．5，少有 下发的盐