电针背俞穴改善血管性痴呆大鼠海马区突触结构参数定量的研究.pdfVIP

电针背俞穴改善血管性痴呆大鼠海马区突触结构参 数的定量研究1 许能贵，唐纯志，闫兵，何利雷 广州中医药大学，广州（510405 ） E-mail ：ngxu@ 摘 要：目的：观察电针对血管性痴呆（VD ）大鼠学习记忆能力和大脑海马神经细胞病理 形态学及突触结构参数的影响。方法：采用4-血管阻断法制备VD 模型，用 Morris 水迷宫 测定大鼠学习记忆能力；用病理图象分析系统，计数完整神经细胞数目；应用透射电镜和图 像分析系统测量Gray Ⅰ型突触的突触结构参数的变化。结果：模型大鼠表现明显的学习记 忆障碍，在水迷宫实验中，其潜伏期显著延长（P ＜0.01 ），在原平台象限跨越平台次数与其 余三个象限无显著差异（P ＞0.05 ）；光镜下可见海马锥体细胞层数减少，排列稀疏、不规则， 细胞体积变小，可见核固缩现象，神经细胞减少严重（P0.01 ）；电镜下海马CA3 区Gray Ⅰ 型突触的突触界面曲率、突触间隙宽度、突触后致密物（PSD ）厚度均减小（P ＜0.01 ）；而 电针组潜伏期明显缩短（P ＜0.05 ），相同时间内跨越原平台次数明显多于其余三个象限（P ＜0.01 ）；光镜下变性神经细胞数量显著减少，海马锥体细胞层细胞形态、排列基本正常； 电镜下海马CA3 区Gray Ⅰ型突触的突触界面曲率、突触间隙宽度、突触后致密物（PSD ） 厚度均增大。结论：电针可抑制海马CA3 区神经细胞丢失，并调控Gray Ⅰ型突触结构参数 的变化，从而改善VD 大鼠学习记忆能力。 关键词：电针，血管性痴呆，海马，突触，结构参数 血管性痴呆（VD ）为脑血管病后的主要并发症，严重影响老年人的生活质量，而脑血 管病中以缺血性脑血管病发病率居首位[1] 。目前，针灸治疗脑病的临床疗效是确切的，特别 是针灸治疗VD 。有研究显示突触丢失是VD形成机制之一，而电刺激和针刺结合可促进新突 [2] 触形成，从而改善VD学习记忆能力 。目前，对电针改善突触超微结构的相关研究中，主 要是观察突触的定性变化，而对突触结构参数的定量分析几乎没有。为此，本文对VD模型 大鼠的学习记忆与大脑海马突触的形态学及超微结构的定量变化及电针对其的干预进行了 实验研究，旨在进一步探索针灸治疗VD 的机理，为针灸在此方面的发展提供依据。 1 材料与方法 1.1 动物模型的制备与分组 成年健康SD 大鼠（SPF 级）50 只，雌雄各半，体重180—220g，由广州中医药大学动 物实验中心提供（动物许可证号：SCXK （粤）2003-0001 ；使用实验动物质量合格证编号： 0010134、0010190 ）。随机抽取8 只大鼠作假手术对照组，其余42 只制造缺血模型。动物采 用国际公认的四血管阻断（4-VO ）方法制作模型。用10%水合氯醛（0.35ml/100g 体重）腹 腔注射麻醉大鼠，背侧颈正中切口，暴露双侧第一颈椎横突冀小孔，用直径 0.5mm 电凝针 插入双侧翼小孔烧灼双侧椎动脉，造成永久性闭塞。庆大霉素注射液局部涂擦伤口后用 1 号缝合线缝合伤口。然后，腹侧颈正中切口，分离双侧颈总动脉，穿线备用，用微动脉夹可 逆性夹闭双侧颈总动脉5min，共夹闭3 次，每次间隔10min，缝合伤口。假手术组仅暴露4 条血管，不发生脑缺血，其余手术程序同上。术后七天内死亡15 只，存活只数为27 只，其 中2 只因术后出现偏瘫不能进行水迷宫测试而弃之不用。将实际存活的25 只模型大鼠按雌 1本课题得到国家教育部新世纪优秀人才计划资助项目（NCET-04-0831 ）的资助。 - 1 - 雄和体重随机分为电针组9 只，西药组9 只和模型组7 只。假手术组死亡1 只，存活7 只。 常规饲养、观察。 1.2 主要仪器 SDQ-30 双极射频电凝器（上海手术器械厂）；Morris 水迷宫（广州中医药大学提供）； G860 电针仪（上海）,