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人类ITGAM基因电子克隆的验证 PAGE PAGE 1 人类ITGAM基因电子克隆的验证 摘 要 人的ITGAM基因是通过电子克隆技术获得的一种表达产物为整联蛋白的基因。它是由种子序列HYPERLINK /UniGene/seq.cgi?ORG=HsSID=2817J03925.1组装的，不具有完整阅读框架的EST重叠群通过直接拼接，从而找到对应的大规模测序片段。且在该EST重叠群5’端上游对应的大规模测序片段中寻找与阅读框架起始密码子处于同一阅读框架的终止密码子，从而获得该基因。以前的研究表明，该基因在人的胚胎组织中表达。 本研究主要是验证XXX同学通过电子克隆技术而获得该基因的全长cDNA序列是否在人的 子宫组织中得以表达。具体方法是在与阅读框架起始密码子处于同一阅读框架的终止密码子附近及其上游设计1条引物，在阅读框架起始密码子及其下游设计1条引物，然后用上述引物进行PCR扩增。即提取人的子宫组织的总RNA，通过逆转录反应得到子宫组织的cDNA，且以该cDNA为模板扩增目的片段。琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，通过比较根据人类基因组草图搜索法预测的和实际扩增的目的片段大小，判断是否获得该基因的全长cDNA序列。 结果成功克隆了该基因。 关键词：人类ITGAM基因；电子克隆；RT-PCR Cloning of human gene ITGAM auth