高效液相色谱法测定瘦肉精含量及其发展前景.docVIP

高效液相色谱法测定瘦肉精含量及其发展前景 摘 要：高效液相色谱法是一种高效、快速的现代分析技术，本文简要介绍了高效液相色谱法的特点和在测定原料乳与乳制品中三聚氰胺含量的应用。通过简单介绍有关高等分析化学在近几年食品安全的应用，阐明高等分析化学在人类生活中的重要作用。 关 键 词： 高效液相色谱法 乳制品 三聚氰胺 Abstract: High performance liquid chromatography (HPLC) is a kind of quick and efficient modern analysis technology, this paper briefly introduces the characteristics of high performance liquid chromatography and in the determination of raw milk and dairy products of melamine content through a simple introduction of the application in chemical analysis on higher in recent years the application of food safety, expounds the higher analysis chemistry in human life in an important role key words: higher analysis HPLC dairy products trimeric cyanamide 引 言：高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。 2008年的奶粉事件一方面充分暴露出我国在食品安全上的漏洞，另一方面也必将推动分析化学的继续发展。 三聚氰胺（Melamine），是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，重要的氮杂环有机化工原料。目前，三聚氰胺被认为毒性轻微。但动物长期摄人三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害，膀胱、肾部结石，并可进一步诱发膀胱癌。对于原料乳与乳制品中三聚氰胺含量的测定，国际标准《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》（GB/T 22388-2008）中选用了高效液相色谱法、液相色谱-质谱/质谱法和气相 1.原理 　　用三氯乙酸溶液-乙腈提取试样，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色谱测定，外标法定量。 2.试剂与材料 　 甲醇、乙腈、25％～28％的氨水、三氯乙酸、柠檬酸、辛烷磺酸钠、甲醇水溶液（含50mL甲醇和50mL水）、三氯乙酸溶液（1％）、氨化甲醇溶液（5％）、离子对试剂缓冲液（由柠檬酸和辛烷磺酸钠配制）、三聚氰胺标准品（CAS108-78-01，纯度＞99.0%）、三聚氰胺标准储备液（1mg/mL）。所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。阳离子交换固相萃取柱、定性滤纸、海砂、微孔滤膜、氮气（纯度≥99.999％） 3.仪器和设备 高效液相色谱（HPLC）仪、分析天平、离心机、超声波水浴器、固相萃取装置、氮气吹干仪、涡旋混合器、50mL具塞塑料离心管、研钵。 4.样品处理 (1).提取 ①液态奶、奶粉、酸奶、冰淇淋和奶糖等。 称取2g（精确至0.01g）试样于50mL具塞塑料离心管中，加入15mL三氯乙酸溶液和5mL乙腈，超声提取10min，再振荡提取10min后，以不低于4000r/min离心10min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25mL，移取5mL滤液，加入5mL水混匀后做待净化液。 ②奶酪、奶油和巧克力等。 称取2g（精确至0.01g）试样于研钵中，加入适量海砂（试样质量的4倍～6倍）研磨成干粉状，转移至50mL具塞塑料离心管中，用15mL三氯乙酸溶液分数次清洗研钵，清洗液转入离心管中，再往离心管中加入5mL乙腈，超声提取10min，再振荡提取10min后，以不低于4000r/min离心10min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25mL，移取5mL滤液，加入5mL水混匀后做待净化液。 若样品中脂肪含量较高，可以用三氯乙酸溶液饱和的正己烷液-液分配除脂后再用SPE柱净化。 (2).净化 将待净化液转移至固相萃取柱中。依次用3mL水和3mL甲醇洗涤，抽至近干后，用6mL氨化甲醇溶液洗脱。整个固相萃取过程流速不超过1mL/min。洗脱液于50℃下用氮气