猪MX1基因第8内含子多态性及与生产性状的关联分析.pdfVIP

第 29卷 第4期 华 中 农 业 大 学 学 报 VoI．29 No．4 2010年 8月 JournalofHuazhongAgriculturalUniversity Aug．2010，475~478 猪 MX1基 因第 8内含子多态性 及与生产性状的关联分析 武华玉 李 良华 彭先文 宋忠旭 冯 政 梅书棋 一 1．湖北省农业科学院g-牧兽医研究所，武汉 430064；2．动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，武汉 430064 摘要 对猪MX1基因第8内含子进行了克隆、测序 ，结果发现在 167bp处发现 1个 G／A突变，引起 Hpa Ⅱ酶切多态。利用PCR-RFLP方法对 国内外 6个猪种MX1基因第 8内含子的多态性进行分析，发现在大白、 长白、通城、清平 、鄂西黑猪、大梅Fz代等6个品种中等位基因B的基因频率分别为0．83、0．89、0．94、0．87、0．89 和0．55；在 180头大梅F2代资源家系中进行性状关联分析发现MX1基因第 8内含子的多态性与屠宰率、瘦 肉 率、眼肌高显著关联，屠宰率、眼肌高加性效应显著；眼肌高、瘦肉率显性效应显著。 关键词 猪；MX1；PCR-RFLP；关联分析 中图分类号 S828．2 文献标识码 A 文章编号 1000—2421(2010)04—0475—04 MX蛋 白是 由Lindenmann等在研究近交系 1 材料与方法 A2G小 鼠对流感病毒具有天然免疫力这一现象时 发现并命名的一种 GTPase结合蛋 白，在哺乳动物、 1．1 试验材料 鸟类、鱼类 中高度保守，均受干扰素的诱导表达 ，主 试验所用的大 白猪、长 白猪均采 自湖北省农业 要对 RNA病毒敏感，具有抗流感病毒功能_1]。体 科学院猪场 ，通城猪采 自湖北省通城县通城原种猪 内外试验研究表 明，MX基因受 I型干扰素、双链 场，清平猪采 自当阳市清平猪保种场，鄂西黑猪采 自 RNA的诱导或病毒感染的情况下被激活，表达 MX 湖北省恩施州鄂西黑猪原种场，样本含量见表 1。 蛋 白发挥GTP酶活性 ，水解病毒核衣壳，抑制病毒 大 白猪 ×梅 山猪 (L×M)资源家系F代 180头，全 复制，以抵抗病毒对细胞的感染_2]。 部进行屠宰，根据国家标准GB8467—87E9j进行测定。 MX1基因是迄今为止找到的为数不多的抗性 采集血液，利用常规的苯酚 ／氯仿抽提方法提取基因 组DNA_1，用 TE溶 液将 DNA样 品稀 释成 50 基 因或抗性标记之 一。Salomon等l4]发现 表达 ng／~L，于一20℃贮存备用。 MX1蛋 白小 鼠对高致病性禽流感 H5N1具有天然 1．2 引物及主要试剂 抗性。Horisberger等l5]研究发现猪 MX蛋 白可以 根据长白猪MXl基因序列 (GenBank登录号： 抑制流感病毒、水疱性 口炎病毒的生长，Zhang等 6【] DQ144503)，设计猪的内含子8的特异引物，引物序 发现猪繁殖与呼吸综合症病毒的感染能诱导 MXl 列如下 ： 基因的转录以及MXl蛋 白的表达 。 Forwardprimer：5-TTACAGAAGTATGGCTCCC~3 猪MX1基因定位于 SSC13q47—49，与干扰素 Reverseprimer：5-TTGGTAAACACA2CGACAC-3 受体 1基因紧密连锁L7]，在猪 13号染色体定位 了