食用菌遗传转化的研究进展_郭丽琼.pdfVIP

　食用菌学报 　200 1. 8 (4) :47～53 　A cta Ed ulis Fung i ( ) 文章编号 :1005 - 9873 200 1 04 - 47 - 53 食 用 菌 遗 传 转 化 研 究 进 展 郭丽琼 　　陈守才 　　林俊芳 ( 中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室 ,海南海口　57 110 1) 摘 　要 　食用菌遗传转化的方法主要有 PE G 法 、电激法 、基因枪法 、限制酶介导法 、农杆菌介 导法 ; 采用的启动子有 ras 启动子和 gp d 启动子 ;采用的筛选标记有营养缺陷型标记 、抗生素抗性 筛选标记 、除草剂和杀菌剂抗性筛选标记 、代谢产物抗性筛选标记 。本文综述了这些遗传转化方 法以及启动子 、筛选标记的最新研究进展 。 关键词 　食用菌 ; 遗传转化 ; 限制酶介导法 ; 农杆菌介导法 ; 启动子 ; 筛选标记 中图分类号 : S646 . 032 　　　文献标识码 : A 随着生活水平的提高 ,人们对食用菌数量和品质的要求愈来愈高 。由于食用菌的遗传背 ( ) 景复杂 、育种周期长 、定向性较差 ,传统的食用菌新菌株培育方法 自然选择 、杂交育种 已不能 满足人们对新菌株的需求 。基因工程的发展 ,给食用菌新菌株的培育开辟了一条新的途径 。 ( ) 自1978 年 Hinnen A 等首次利用单倍体酿酒酵母 S accharomy ces cerev is iae L E U2 菌株的互 补菌株转化获得成功以来 〔1〕,许多研究者相继报道了利用酵母和丝状真菌的显性营养缺陷型 为标记的遗传转化研究结果 〔2 〕,这标记着真菌的遗传转化研究进入了一个新的阶段 。世界上 报道的第一例担子菌遗传转化是 1986 年 Muoz - Rivas A 等利用 P E G 法把同源的 TR P C 基 ( ) ( ) 因转入裂褶菌 S chiz op hy l l u m com m u ne 色氨酸营养缺陷型突变株 t rp C 菌株 中 ,获得正常 的裂褶菌菌株 〔3 〕。而食用菌的遗传转化研究起步较晚 ,最早报道的是 199 1 年 Challen M P 等 ( ) 利用 P E G 法把外源 DNA 导入双孢蘑菇 A g aricus bisp or us 受体菌的原生质体 内获得转化 〔4 〕 子 和同年 Royer J C 等利用电穿孔法把编码二氢乳清酸脱氢酶基因 URA 1 转入同源的杨树 ( ) ( ) 〔5 〕 菇 A g rocy be cy l i nol racea 营养缺陷型突变菌株 u ra 1 菌株 中的结果 。1994 年 ,No ёl T 等 以同样的方法建立了杨树菇的同源转化系统 〔6 〕。而 Li A 等于 1993 年利用基因枪法轰击双孢 蘑菇的菌丝体和子实体 ,把外源基因转入双孢蘑菇菌株中〔7 〕。然而这些转化研究都遇到了相 似的难题 ,即供体 DNA 进入受体菌以后重组活性低 , 甲基化严重 ,在异源启动子调控下不能 充分表达 〔8 〕。因而科学家们不断地寻找新的转化方法和基因表达元件 , 以建立起稳定的食用