利用ISSR技术探讨大豆属植物的亲缘关系.pdfVIP

维普资讯 吉林农业科学 2007，32(6)：30—32，38 JournalofJilinAgriculturalSciences 文章编号：1003—8701(2007)06-0030—03 利用 ISSR技术探讨大豆属植物的亲缘关系 王玉民，姜 昱，康岭生，赵桂兰 木 (吉林省农业科学院生物技术研究中心，长春 130033) 摘 要：对大豆属 G 册亚属 l9份多年生野生大豆 、Soja亚属2份野生大豆和 2份栽培大豆进行 了 ISSR分析。结果表明：1．在 Soja亚属中野生大豆和栽培大豆的指纹图谱很相近，相似性系数高达0．961，但在 野生大豆和栽培大豆之间存在特异谱带。2．Gf)，c 亚属二倍体材料中，染色体组型为A类的G．argyrea、G． call,e$cen$和G．clandestina很好地聚为一类 ；G．curvata和 G．cyrtoloba的染色体组型同为 c类 ，其指纹图谱的 相似程度也较高；B类染色体组型G． z 和G．tabacina(2n=40)的亲缘关系亦较近，同为B类染色体组型的 G．microphylla却与染色体组型为 c组的G．curvata和 G．cyrtoloba的指纹图谱比较接近。3、G i册 亚属多倍体 材料中在 G．tomentella和G．tabacina种内的多倍体材料的亲缘关系较近 ，尽管其地理来源不同；染色体组型 为DD的 G．tomentella(2n--40)和染色体组型为 EE的G．tomentella(2n=38)与其它多倍体种的亲缘关系较远。4． Soja亚属和 G 册 亚属的相似性系数很低，亲缘关系较远 ，很早就发生了分化。 关键词：大豆属：多年生野生大豆 ；ISSR 中图分类号 ：Q75 文献标识码：A 大豆属植物属于豆科大豆亚族 ，据 1999年最新结果f11，大豆属现在 由 l7个种组成 ，包括 G ine 和Soja两个亚属 ，主要是一年生和多年生种。大豆属种间亲缘关系的研究不仅是研究大豆起源、进化 和分类的重要手段，对大豆基因组学的研究和遗传育种也有着重要意义。 ISSR(Inter-simplesequencerepeats)是采用一个简单重复序列为引物，通过聚合酶链式反应来扩增 两个相邻的方向相反的微卫星之间的区域2【1。它结合了RAPD和SSR两项技术的优点 ，简单易操作 、 费用低、多态性高、稳定性好。该技术可以用于任何含有大量简单重复序列的物种 ，而且不需要知道 基因组的序列。用作 ISSR分析的引物可以是基于任何SSR重复序列 ，可以是二碱基 、三碱基、四碱基 或是五碱基等。ISSR 的引物设计 比SSR简单，不需知道 DNA序列即可用引物进行扩增，目前 ISSR 分析已广泛用于遗传多样性评价、品种鉴定等领域。周延清等(2006)t喇用 ISSR分析河南大豆的遗传 多样性；谢甫绨等(2003)t】利用 ISSR分子标记进行不同来源大豆品种的分类 ；金燕(2003)t刷用 ISSR 标记研究野生大豆居群内遗传变异。但是 ，还没有用于大豆属植物亲缘关系方面研究的报道。 本文采用 ISSR标记技术，对大豆属植物 23份材料进行了遗传关系分析 ，旨在探讨大豆属植物的 亲缘关系和分类地位。 1 材 料 与 万 法 1．1 材料 本实验所用试材均来 自吉林省农业科学院生物技术研究中心，包括多年生野生大豆 l0个种 l9 份材料，一年生野生大豆 2份，栽培大豆2份(表 1)。 1．2 DNA提取 DNA提取采用试剂盒进行。取叶片0．5g液氮研磨，加入 300 L5M异硫氰酸胍溶液，裂解 5 收稿 日期 ：2007—05—14 作者简介 ：王玉~(1968一)，男，研究员，主要从事大豆分子生物学研究。 通讯作者 ：赵桂兰 维普资讯 6期 王 民等：利用 ISSR技术探讨大豆属植物的亲缘关系