DB34T 821-2008 动物组织中氯霉素的残留测定 ——酶联免疫吸附法.pdfVIP

ICS 备案号： DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB34/T 821—2008 动物组织中氯霉素的残留测定 ——酶联免疫吸附法 2008-08-01 发布 2008-08-01 实施 安徽省质量技术监督局 发布 食品伙伴网/ DB34/T 821—2008 前 言 本标准由安徽省畜牧兽医局提出。 本标准由安徽省质量技术监督局批准。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所、安徽省畜产品质量安全检测中心。 本标准起草人：许世富、汤春莲、明文庆、张莉。 本标准于2008年8月1日首次发布。 I 食品伙伴网/ DB34/T 821—2008 动物组织中氯霉素的残留测定 ——酶联免疫吸附法 1 范围 本标准规定了动物肌肉、肝脏、肾脏中氯霉素检验的制样和酶联免疫吸附测定方法。 本标准适用于动物肌肉、肝脏、肾脏中氯霉素的残留快速测定。 本方法在动物肌肉、肝脏、肾脏中的检测限为0.1μg/kg，线性范围：0.0025ng～0.2025ng。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 试样制备 动物肌肉、肝脏、肾脏，去筋后切成小块，制成肉糜后，于－18℃以下温度冷冻保存。 4 原理 动物组织中残留的氯霉素经乙酸乙酯提取，正己烷脱脂后用于酶联免疫测定。本测定方法是酶联免 疫法中的竞争性测定法，其主要原理是：吸附在孔内的氯霉素与标准或样品中的氯霉素竞争性地与氯霉 素抗体相结合，与标准品或样品相结合的氯霉素抗体被洗涤去除后，只剩下与微孔内药物相结合的抗体， 其再与加入的酶标记的第二抗体相结合，酶底物在酶作用下产生发色物，在一定浓度范围内吸光度的高 低与样品中氯霉素的含量成反比。 5 试剂和溶液 5.1 除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为去离子水，符合 GB/T 6682 二级水的规定。 5.2 竞争酶标免疫法氯霉素试剂盒，2℃～8℃冰箱中保存。 5.2.1 微孔板：包被有氯霉素抗体。 5.2.2 氯霉素标准溶液：浓度范围 0.05μg/L～4.05μg/L 。 5.2.3 酶标记物。 5.2.4 氯霉素抗体浓缩液。 5.2.5 底物 A。 5.2.6 底物 B。 5.2.7 终止液。 5.2.8 样品稀释缓冲液。 5.2.9 浓缩洗涤液。 5.2.10 浓缩复溶液。 5.3 洗涤液：用水 20 倍稀释厂商提供的浓缩洗涤液。 5.4 复溶液：用水 2 倍稀释厂商提供的浓缩