高效液相色谱法测定小鼠血浆和脑中的丹参酮ⅡA及药代动力学研究.pdfVIP

第36卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第12期 Journalof 1677—1682 2008年12月 Chinese AnalyticalChemistry 高效液相色谱法测定小鼠血浆和脑中的 丹参酮ⅡA及药代动力学研究 甘发平 韩铮 栾连军 周长新 吴永江4 (浙江大学药学院现代中药研究所，杭州310058) 摘要建立了小鼠血浆和脑中丹参酮ⅡA(TsⅡA)的高效液相色谱分析法，并用于测定静脉给药后小鼠血 浆和脑中TsⅡA浓度的动态变化及药动学参数。小鼠尾静脉注射TsⅡA单体8．0 me,／kg，血浆及脑样品经乙 酸乙酯萃取后，用HPLC法检测。所建立的血浆样品分析方法线性范围为0．05～7．12 ms／L，相关系数r= 0．9984；脑样品分析方法线性范围为0．022～2．37 mg／L，相关系数r=0．9988；血浆和脑样品中最低定量限分 别为0．0498和0．022ms／L；检小限分别为0．0255和0．0166mr／L；日内和日间RSD10．3％。本方法专属、 11A 准确、灵敏，可以定量检测小鼠静脉注射后TsⅡA在血和脑中的浓度。TsⅡA静脉给药后，小鼠血浆中Ts min TsII 浓度-时间变化可用三室模型拟合，峰浓度为1．58mg／L，AUC(0一t)值为68．18mg／L·min。给药后5 A在小鼠脑中即可达峰值0．17mg／L，且480rain时仍能在脑组织中测到，表明TsⅡA能很快透过血脑屏障， 且能在脑组织中停留较长时间。 关键词丹参酮ⅡA，高效液相色谱法，药代动力学，小鼠，血浆，脑 1 引 言 II 1I 丹参酮ⅡA(TanshinoneA，TsA)系从唇形科植物丹参的根中分离的二萜醌类化合物，临床和 药理实验结果表明，TsⅡA对心脑血管疾病有确切的疗效…，对脑缺血损伤有明显的保护作用。1。由 于TsⅡA能有效作用于脑，因此，建立血浆和脑中TsⅡA浓度的测定方法，对于研究TsⅡA透过血脑屏 障的行为，全面了解TsⅡA的药理作用特点具有重要意义。 中TsⅡA浓度的方法和关于TsⅡA透过血脑屏障的研究报道很少。Bi等¨训建立了测定TsⅡA在大鼠 各组织中浓度的LC／MS／MS法，并应用于灌胃给药后TsⅡA在大鼠的组织分布研究，结果表明TsⅡA h 能快速分布到大鼠的各个组织，在各组织中浓度大多在4h达到峰值，且在体内消除较慢，给药后20 仍能在大鼠的大部分组织中测到TsⅡA。Lam等¨川研究表明，TsⅡA经腹腔注射易透过血脑屏障，给药 60rain后在脑中达到峰值，并能降低脑梗塞体积。但这些研究并未考察TsⅡA在脑中的浓度变化特 点。本研究旨在于建立简单准确地测定小鼠血浆和脑中TsⅡA浓度的高效液相色谱法，并测定静脉给 药后小鼠血浆和脑中TsⅡA的浓度变化，考察其透过血脑屏障的行为，为TsⅡA剂型改革以及透过血 脑屏障的研究提供依据。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 Waters 超纯水。 2．2实验方法 mmx4．6 2．2．1色谱条件色谱柱：Di锄onsil俐C。8