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第35卷 分析化学(FENxIHuAXuE)研究报告 第12期 ChineseJoumalof 1696～1700 2007年12月 AnaJyticalChemistry 脂质体荧光衰减技术预测10种中药单体的被动吸收 邓丹丹 刘彩云 廖志新 梁建英 卢建忠8 (复旦大学药学院，上海200032) 摘要制备了DPH荧光脂质体，选用10种药理活性较好的中药单体，测定了这些中药单体进入荧光脂质 体后引起的荧光衰减百分率，评估中药单体的细胞膜通透性。采用大鼠在体肠单向灌流实验测定了中药单体 的小肠有效透皮系数(P。。)，与中药单体引起的脂质体荧光衰减数据对比，两者相关性良好，从而证明荧光脂 质体模型可以应用来预测中药单体的被动吸收。用DPH标记红细胞膜，测定了以上10种中药单体对荧光标 记的红细胞膜的荧光衰减百分率，发现荧光脂质体与红细胞膜相关性良好，荧光脂质体模型的确可以一定程 度上替代制备繁琐的红细胞膜，用来研究中药单体在真实细胞膜中的通透性。综合而言，荧光脂质体模型简 单易行、重现性好、所需样品量少，适合于中药早期研究的高通量筛选。 关键词荧光脂质体，中药单体，细胞膜通透性，大鼠小肠吸收实验，红细胞膜 1 引 言 药物的活性、毒性、体内分布及其它生理作用，都与药物在膜上的分配状况有关L1J。药物药效的大 小在一定程度上能用该药物的细胞膜通透性来体现，考察药物细胞膜通透性可以作为一种可靠而快捷 的药物活性评估技术。 脂质体能很好地模拟细胞膜的脂双层结构和膜的流动性。因此，脂质体在研究药物细胞膜通透性 药物的细胞膜通透陛。此后，许多科研工作者利用荧光脂质体来研究药物与细胞膜的相互作用”J。与 以前的药物评估技术相比，这种新型的荧光仿生膜技术不但简便、快捷、样品用量少，还能够研究药物的 作用机理、初筛和改造候选药物。 +． 中药已成为国内外新药研究的热点。中药组成复杂，含有许多活性成分，要研究众多成分的药学性 质需要简单、快速、准确、高通量的模型。常规的药学研究技术如油水分配系数、动物模型、细胞模型等 难以应用于中药活性成分的快速分析。本实验选择10种药理活性较好的中药单体丹参酮I、丹参酮Ⅱ A、隐丹参酮、盐酸小檗碱、大黄酸、芦荟苷、芦荟大黄素、大黄素甲醚、柚皮素及异秦皮啶，利用这些中药 单体进人荧光脂质体后引起的荧光衰减，评估它们的细胞膜通透性，预测了这些中药单体的被动吸收。通 过与目前常用的大鼠小肠单向灌流吸收实验比较，评价了两者的相关性。红细胞膜适用于研究质膜，且已 被多次应用在药学研究中。为此，实验采用红细胞膜为真实细胞膜的典型代表，对比了荧光脂质体和大鼠 红细胞膜荧光衰减数据，进一步验证了荧光脂质体模型能够较好地模拟中药单体与真实细胞的相互作用。 2 实验部分 2．1仪器和试剂 皮啶、盐酸小檗碱、大黄酸、丹参酮ⅡA(中国药品生物制品检定所)；芦荟苷、芦荟大黄素、大黄素甲醚、 1，2一distearoyl—sn—91ycem-3-[phopho—rac一(1-glycer01)](sodium phenyl—1，3，5一hexatriene(DPH)(美国Sigma公司)；5(and 2007田2—14收稿；2007聊旬3接受 本文系国家自然科学基金资助(No20675019) $E—mail：jzlu@shmu．edu．cn 万方数据万方数据 第12期 邓丹丹等：脂质体荧光衰减技术预测lO种中药单体的被动吸收 2．2 中药单体对脂质体荧光的影响 2．2．1 mL 中药单体对DPH脂质体的影响分别称取23．6 DSPG，溶于6 mg磷脂酰胆碱和2．40mg