3种不同的survivin siRNA对EJ28细胞增殖和凋亡的影响.pdfVIP

维普资讯 第29卷第 22期 第 三 军 医 大 学 学 报 Vo1．29，No．22 2152 2007年 11月 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE NOV．20o7 论著 文章编号：1000-5404(2007)22-2152—40 3种不同的survivinsiRNA对 EJ28细胞增殖和凋亡的影响 吴 跃，苟 欣，吕天兵，余 周 (重庆医科大学附属第一医院泌尿外科，重庆400016) 提 要：目的 观察靶向survivin的不同siRNA对EJ28细胞增殖和凋亡的影响。方法 通过化学合成方法合成 3对 siRNA和 1对荧光标记 的阴性对照 siRNA。转染荧光标记的 siRNA后，在荧光显微镜下观察转染效率。实验分为 siRNA164、siRNA167、siRNA389、阴性对照组、脂质体对照组和细胞对照组。转染后 24、48h和72h，M啊 法检测 siRNA对 EJ28细胞增殖的影响，流式细胞术检测凋亡率。结果 靶向survivin的序列特异性 siRNA均能抑制 EJ28细胞的增殖 ，其 中以siRNA164抑制细胞的增殖能力最强(P0．05)，转染48h后的抑制率最高[(41．32±2．54)％]；转染48h后 ，siRNA164 组凋亡率最高[(13．20±0．25)％]。结论 靶向survivin的RNAi技术在膀胱癌的基因治疗中可能具有一定的价值。 关键词：EJ28细胞；survivin；小干扰 RNA；转染 中图法分类号：R73—362；R730．23；R737．14 文献标识码：A ProliferationandapoptosisofEJ28cellsinduced by3differentsurvivin-targeted siRNA WUYue，GOUXin，LUTian—bing，YUZhou(DepartmentofUrology，theFirstaffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity， Chongqing400016，China) Abstract：Objective Toexploretheproliferativeandapoptoticeffectof3differentsiRNAstargetingsur- vivininhumanbladdercancercelllineEJ28．Methods ThreesiRNAstargetingsurvivinand1fluorescence— labeledsiRNA asanegativecontrolwerechemicallysynthesized．Transfetionefficiencywasobservedunderflu— orescencemicroscopeaftertransfectingthefluorescence—labeledsiRNAs．EJ28cellsweredividedinto6groups： siRNA164group，siRNA167 group，siRNA389rgoup，andnegativecontrolgroup，lipofectin rgoup and cell controlgroup．TheproliferationofEJ28cellwasdetectedbyM1Trassayat24．48and72hafterthetransfec— tion．ApoptoticratewasdetectedbyAnnexinV—FITC—FCM assayat48h．Results Allthesequence—specific siRNAstargetingsurvivinefficientlysuppressedtheprolif