基因工程汇总.docVIP

基因工程的基本条件 、用于核酸操作的工具酶：限制性核酸内切酶、DNA连接酶（修复双链DNA上缺口处的磷酸二酯键）、DNA聚合酶、核酸酶、核酸修饰酶 （2）、用于基因克隆的载体：载体的功能及特征、质粒（plasmid）、噬菌体或病毒DNA、考斯质粒（cosmid）与噬菌粒 人造染色体载体 载体的功能:1)、运送外源基因高效转入受体细胞 2）、为外源基因提供复制能力或整合能力 3）、为外源基因的扩增或表达提供必要的条件 载体应具备的条件：1）具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性（可转移性）； 2）具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点 ； 3）具有较高的外源DNA的载装能力 ； 4）具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点 ； 5）具有合适的筛选标记 。 (3)、受体细胞应具备的条件： 1）限制性缺陷型：外切酶和内切酶活性缺陷（recB-，recC-，hsdR-） 2）重组整合缺陷型：用于基因扩增或高效表达的受体细胞（recA-） 3）具有较高的转化效率 4）具有与载体选择标记互补的表型 5）感染寄生缺陷型：防止重组细菌扩散污染，生物武器除外 各种基因工程受体的特性 1）、大肠杆菌：遗传背景清楚，载体受体系统完备，生长迅速，培养简单，重组子稳定；产结构复杂、种类繁多的内毒素；适用于外源DNA的扩增和克隆、原核生物基因的高效表达、基因文库的构建，是DNA重组实验和基因工程