Actinobacillus succinogenes抗氟乙酸突变株选育及代谢流量分析.pdfVIP

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2017-08-29 发布于安徽
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Actinobacillus succinogenes抗氟乙酸突变株选育及代谢流量分析.pdf

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生物工程学报 Chin J Biotech 2008, March 25; 24(3): 460-467 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@ © 2008 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 研究报告 Actinobacillus succinogenes 1 1 1 1 2 1 刘宇鹏 , 郑璞 , 倪晔 , 董晋军 , 韦萍 , 孙志浩 1 ; , 214122 2 , 210009 : 琥珀酸是一种用于合成树脂、可降解塑料及许多化学中间体的重要绿色化工原料。为了提高琥珀酸的发酵产率, 基于 Actinobacillus succinogenes 的代谢流量分布情况对其育种机制进行了研究。以 Actinobacillus succinogenes CGMCC1593 为原始菌株进行NTG 诱变, 挑选在含有50~100 mmol/L 氟乙酸平板生长较快的菌落, 经过初筛和复筛, 发现 SF-9 菌株产生更多琥珀酸且积累乙酸较少。以50 g/L 的葡萄糖为碳源, 在5 L 发酵罐上进行分批发酵, 该菌株发酵 32 h 时琥珀酸产量(34.8 g/L)提高了23.4%, 琥珀酸/ 乙酸比率为9:1, 副产物乙酸量比原始菌株降低了约50% 。代谢流量分析(MFA)结果表明, PEP 是影响琥珀酸合成的关键节点, PYR 是影响乙酸等杂酸生成比例的关键节点, 并且这两个节点均非刚性节点。通过氟乙酸抗性诱变, 成功地筛选出了流向乙酸、甲酸和乳酸等杂酸的流量相对减少, 而流向琥珀酸的流量明显增强的突变菌株SF-9。 : 琥珀酸, 育种, 氟乙酸, 代谢流量分析(MFA) Breeding of Monofluoroacetate-resistant Strains of Actinobacillus succinogenes and the Mechanism Based on Metabolic Flux Analysis 1 1 1 1 2 1 Yupeng Liu , Pu Zheng , Ye Ni , Jinjun Dong , Ping Wei , and Zhihao Sun 1 School of Biotechnology, Jiangnan University, The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education , Wuxi 214122, China 2 College of Life and Pharmaceutical Engineering, Nanjing University of Technology, Nanjing 210009, China Abstract: Succinic acid has received a great deal of attention as