第六章 微生物的生长及其控制1.pptVIP

第六章 微生物的生长及其控制 血球计数板的结构 一块特殊的载玻片，中间两个平台上各刻有一个大方格网。 方格网的结构 方格网由九个大方格组成，中间的大方格为计数室。 计数室： 边长1mm、 高0.1mm， 体积0.1mm3 等于10-4 ml 典型的生长曲线 （Growth curve） 一些细菌的代时 菌名 培养基培养温度℃ 代时min E. coli（大肠杆菌） 肉汤 37 17 E. coli 牛奶 37 12.5 Enterobacter aerogenes（产气肠细菌） 肉汤或牛奶 37 16~18 E. aerogenes 组合 37 29~44 B. Cereus（蜡状芽孢杆菌） 肉汤 30 18 B. thermophilus（嗜热芽孢杆菌） 肉汤 55 18.3 Lactobacillus acidophilus（嗜酸乳杆菌） 牛奶 37 66~87 Streptococcus lactis（乳酸链球菌） 牛奶 37 26 S. lactis 乳糖肉汤 37 48 Salmonella typhi（伤寒沙门氏菌） 肉汤 37 23.5 Azotobacter chroococcum（褐球固氮菌） 葡萄糖 25 344~461 Mycobacterium tuberculosis（结核分枝杆菌）组合 37 792~932 Nitrobacter agilis（活跃硝化杆菌） 组合 27 1200 营养物浓度与对数期生长速率和产量 作用方式：影响微生物的生长速率和总生长量 生长限制因子：凡是处于较低浓度范围内，可影响生长速率和菌体产量的营养物就称生长限制因子 不同温度下的代时 温度对微生物的代时有明显影响： E. Coli 在不同温度下的代时 温度（℃） 代时（分） 温度（℃） 代时（分） 10 860 35 22 15 120 37 17 20 90 40 17.5 25 40 45 20 30 29 47.5 77 应用意义： ①由于此时期的菌种比较健壮，增殖噬菌体的最适菌龄；生产上用作接种的最佳菌龄； ②发酵工业上尽量延长该期，以达到较高的菌体密度 ③食品工业上尽量使有害微生物不能进入此期 ④是生理代谢及遗传研究或进行染色、形态观察等的良好材料。 （三） 稳定期（stationary phase） 又称：恒定期或最高生长期 特点：①新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等，微生物的生长速率处于动态平衡，培养物中的细胞数目达到最高值。 ②细胞分裂速度下降，开始积累内含物，产芽孢的细菌开始产芽孢。 ③此时期的微生物开始合成次生代谢产物，对于发酵生产来说，一般在稳定期的后期产物积累达到高峰，是最佳的收获时期。 产生原因： 营养物尤其是生长限制因子的耗尽 营养物的比例失调，如碳氮比不合适; 有害代谢废物的积累（酸、醇、毒素等） 物化条件（pH、氧化还原势等）不合适; 应用意义： 1）发酵生产形成代谢产物的重要时期（抗生素、氨基酸等），生产上应尽量延长此期，提高产量，措施如下： 补充营养物质（补料） 调pH 调整温度 2）稳定期细胞数目及产物积累达到最高。 生长产量常数（Y，或生长得率，growth yield）： 概念：表示微生物对基质利用效率的高低 Y=菌体干重/ 消耗营养物质的浓度 根据产量常数可确定微生物对营养物质的需要量 x-稳定期细胞干重 ；x0-接种时细胞干重 ；C-稳定期限制性营养物浓度；C0-限制性营养物最初浓度 如：Y=0.5，表示要得到5g菌体，需某营养物（葡萄糖）10g。 Y= x – x0 C0 – C = x – x0 C0 （四） 衰亡期（decline phase） 现象：整个群体出现负生长（R 0） 特点：①细胞死亡数增加，死亡数大大超过新增殖的细胞数，群体中的活菌数目急剧下降，出现“负生长”。 ②细胞内颗粒更明显，细胞出现多形态、畸形或衰退形，芽孢开始释放。 ③因菌体本身产生的酶及代谢产物的作用，使菌体死亡、自溶等，发生自溶的菌生长曲线表现为向下跌落的趋势。 衰亡期比其他各时期时间长，它的长短也与菌种和环境条件有关。 产生原因：生长条件的进一步恶化，使细胞内的分解代谢大大超过合成代谢，继而导致菌体的死亡 丝状微生物的群体生长 丝状微生物的纯培养采用孢子接种，在液体培养基中震荡培养或深层通气加搅拌培养，菌丝体通过断裂繁殖不形成产孢结构。可以用菌丝干重作为衡量生长的指标，即以时间为横坐标，以菌丝干重为纵坐标，绘制生长曲线。 可分为三个阶段：