的应用搅拌式生物反应器大量扩增人胎盘间充质干细胞实验的研究.pdfVIP

28卷 5期 中 国 生 物 医 学 工 程 学 报 Vo1．28 No．5 2009年 1O月 ChineseJournalofBiomedicalEngineering October 20o9 应用搅拌式生物反应器大量扩增人胎盘 问充质干细胞的实验研究 于艳秋 任海琴 李 昆 鲍春雨。刘天庆。金玉楠 云 伟 董 博 (中国医科大学基础医学院病理生理教研室 ，沈 阳 110001) (沈阳菁华医院，沈阳 1lO001) (大连理工大学干细胞与组织工程研 究室，大连 116024) 摘 要：探讨应用搅拌式生物反应器培养技术体外扩增人胎盘问充质干细胞 (hPDMCs)的方法。以hPDMCs为种子 细胞，利用微载体悬浮法在搅拌式生物反应器 内进行体外培养，同时设置静态培养的培养瓶为对照组，观察细胞的 扩增速率、细胞代谢 (乳酸、葡萄糖、培养液的 pH值)的变化，检测生物反应器培养前、后于细胞的表面标记物。 hPDMCs在搅拌式生物反应器 内每代可以扩增 (1O．55±1．62)倍 ，明显高于对照组 (6．10±0．11)倍的扩增值 (P O．O5)，且细胞生长代谢指标优于对照组；流式细胞仪检测应用搅拌式生物反应器，培养后细胞表面标记物的表达 率无明显改变(P0．05)。搅拌式生物反应器能够提供 良好的细胞生长环境 ，建立用于 hPDMCs的大量扩增的体外 三维培养体系 。 关键词 ：间充质干细胞 ；生物反应器 ；细胞扩增 ；人胎盘 LargeScaleExpansionofHumanPlacenta-delvedMesenchymal Cellsin StirringBioreactor YUYahQiu RENHai．Qin2 LIKun BAOChun．Yu LIUTian．Qing3 JINYu-Nan YUNWei DONGBo (DepartmentofPathophysiologyChinaMedicalUniversity，Shenyang110001) (ShenyangJinghuaHospital，ShenyangllO001) (StemCellandTissueEngineeringLaboratoryofDalianUniversityofTechnology，Dalian116024) Abstract：Thisstudyisaimedtoexpandhumanplacenta—derivedmesenchymalstemcells(hPDMCs)inastirring bioreactor．hPDMCswere cuhuredon cyterdex．3microcarrierin a stirringbioreactor，static cultureflask forthe controlgroups．Thevelocityofexpansionandmetabolism indexes (1acticacid，glucose，pH inmedium)wele detedcted．ThesurfacemarkerofhPDMCswasdetectedbyFACS．hPDMCswereexpanded(10．55．4-1．62)times cultivatedinthestirringbioreactorperpassage，markedlysurpassedthatofthecontrolgroups(6．10±0．11)times (P0．05)，andtherewasnosignificantchangeofthesulfacemarkersofhPDMCsculturedinthestirringbioreactor (P 0．05)．Th