忧虑康液对抑郁肾阴虚大鼠5-HT和肾形态学的影响.pdfVIP

第26卷第 1期 湖南中医杂志 Vo1．26 No．1 2010年 1月 HUNANJOURNALOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE Jan 2010 ·95 · 忧虑康液对抑郁肾阴虚大 鼠5一HT和肾形态学的影响① 湖南中医药大学(410208) 陈晓阳，李晟②，邹志③，陈容④，秦莉花 关键词 忧虑康液；模型，动物；实验研究 肾阴虚是抑郁症中常见证 型之一_lJ，我们同期研究资 组8只。整个实验过程中动物 自由摄食和饮水(禁食禁水 料表明 ]，忧虑康液能影响肾阴虚抑郁模型大鼠行为学和 应激除外)，室温 (22±3)℃ (热、冷应激除外)，自然昼夜节 调整血浆cAMP、cGMP含量的平衡，明显改善其抑郁行为和 律光照，相对湿度60％一70％，背景噪音 (40±10)db。 肾阴虚状态。本实验通过复制肾阴虚抑郁大鼠模型，测定 2．2 造模及给药 参照文献方法，并加以改进。除正常组 下丘脑5一HT含量并观察肾脏组织形态学的变化，从 “肾、 外，其余各组均连续接受各种不同的应激及灌胃甲状腺素以 脑相关”角度进一步探讨忧虑康液滋肾抗抑郁的作用机制， 制备肾阴虚型抑郁症病证复合模型 J。采取单笼饲养，并按 现介绍如下。 以下程序从实验第 1天起给予应激刺激，即昼夜颠倒 ，禁食禁 1 实验材料 水，潮湿垫料，鼠笼倾斜 ，40℃高温环境，夹尾，4~C冰水游泳 ， 1．1 动物 健康 SD大鼠，雌雄各半，体重 170～190g，由湖 陌生异常物品，电击足底 ，共8种应激因子，随机安排每 日1 南省长沙市开福区东创科技服务部提供，合格证号：SYXK 种，连续21日；并每 日灌胃甲状腺素2．5mg／(kg·d)。造模 (湘)2006—0001。 同时氟西汀组给予盐酸氟西汀3．6mg／kg，地黄丸组给予六味 1．2 药物 忧虑康液由熟地黄、何首乌、郁金、石斛、丹参、 地黄丸1．6g(生药)／kg，忧虑康低、中、高剂量分别给予忧虑 当归等药物组成 ，饮片购于湖南中医药大学第一附属医院 康液7．2g(生药)／kg、14．4g(生药)／kg、28．8g(生药)／kg，各 药剂科。第 1次8倍体积饮用水冷浸30min，再提取40min， 组治疗药物灌胃容量为10ml／kg；．~t常组与模型组均灌 胃等容 纱布过滤，第2次 4倍量水提取 30min，过滤，合并两次滤 量蒸馏水 ，每 日给药 1次。 液，减压浓缩成相应浓度 (浸膏)，4~C保存备用；六昧地黄丸 2．3 观察模型动物一般状态及体重 实验过程中观察大 鼠 (湖南省长沙九芝 堂股份有 限公 司生产 ，产 品批 号 ： 外表、性情 、活动情况、饮水量、大便情况，每周测 1次体重。 盐酸氟西汀胶囊 (优克)，购于常州华生制药有限 2．4 液体消耗试验、敞箱试验 同期研究 已有具体操作 公司，产品批号 甲状腺素片购于济南维尔康生化 方法 。 制药有限公司，产品批号：0505505。 2．5 脑组织5一HT测定 参照文献 的方法，采用荧光分 1．3 试剂与仪 器 盐酸 5一羟色胺标准 品，美国 sigma公 光光度计以425nm作为发射波长，各组大鼠处死后，开颅取下 司；邻苯二 甲醛，用浓盐酸配成 60mg／L溶液；酸性正丁醇， 丘脑脑组织匀浆，测定各组下丘脑匀浆中5一HT的荧光强度， 500ml正 丁 醇 中加 0．85ml浓 盐 酸；1％ 半 胱 氨 酸 建立标准曲线后，通过其荧光强度得出各组5一HT的含量。 (L—Cysteine)；0．1mol／LHCI；0．01mol／LHCI；无水 乙醇；浓 2．6 肾脏形态学观察 大鼠处死后，取两侧肾脏，固定48h， 盐酸 ；正庚烷；0．02％NaIO；去离子水；生理盐水等。荧光分 冠状面切开，石蜡包埋，各级浓度脱水，